白血病初诊患者血细胞分析仪的白细胞散点图及警示信息评价

作者:王霄霞
作者单位：温州医学院第一附属医院 检验科，浙江 温州 325000

【摘要】  目的:探讨BECKMAN-COULTER.GENS血液分析仪在检出白血病及判断白血病类型中的作用。方法:收集119例初发白血病的血标本，分析白细胞散点图、白细胞警示信息、血涂片分类等指标。结果:118例患者出现异常散点图，其中急性早幼粒细胞白血病（M3）、慢性粒细胞白血病（CML）有一定特征性，而其他类型白血病散点图各种各样。初诊白血病患者散点图的白血病细胞系列与实际白血病细胞系列符合率为50%；而CML、M3（M3V除外）及慢性淋巴细胞白血病(CLL)符合率为100%。警示有原始细胞者符合率为97.5%；警示有幼粒细胞者符合率为97%；警示有异型淋巴细胞者符合率为14.7%。结论:异常白细胞散点图和警示异常细胞信息是发现白血病的重要指标（散点图优于警示信息），并有助于判断白血病类型。警示原始细胞、幼粒细胞者，其结果可信度高，警示异型淋巴细胞者，可信度低。

    【关键词】  血细胞分析仪 散点图 警示信 白血病

    白血病是一种常见的血液系统恶性疾病，尽快做出诊断是我们检验工作者的一项重要任务。目前，五分类血细胞分析仪的普及，使血液常规检测具备了报告全面（提供几十项实验参数）、检验结果快捷、准确等特点，成为了白血病重要的初筛手段。虽然血细胞分析仪的普及已多年，其指标主要集中在血细胞数和直方图（主要与细胞大小有关）方面[1～4]，而有关白细胞散点图、警示信息与白血病关系的国内外相关报道罕见[5]。如何充分利用血细胞分析仪所提供的指标，及早发现初诊白血病、判断白血病类型是我们要研究的。为此对白细胞散点图、异常白细胞警示信息等进行观察、分析，现报告如下。

    1  材料和方法

    1.1  标本来源  收集2005年9月至2007年1月期间我院住院及部分门诊白血病初发患者119例，均经我院MICM分型确诊为白血病并确定了类型，其中慢性粒细胞白血病（CML）慢性期20例、慢性淋巴细胞白血病（CLL）10例、急性淋巴细胞白血病（ALL）25例、急性粒细胞白血病（指M1 和M2）18例、急性早幼粒细胞白血病（M3）14例、急性粒单核细胞白血病（M4）13例、急性单核细胞白血病（M5）14例、红白血病2例、慢性粒单核细胞白血病2例、急性巨核细胞白血病1例。

    1.2  主要仪器  血常规检查所使用的仪器是BECKMAN-COULTER.GENS血细胞分析仪，显微镜为OLYMPUS CH30。

    1.3  方法  用含EDTA-K2抗凝的真空采血管采集初发白血病患者静脉血2 ml，采血后4 h内完成五分类血细胞分析仪的检测，同时推血涂片5张进行瑞氏染色，在血膜厚薄适宜的部位计数、分类100个白细胞，计数及分类要求参照美国临床实验室标准化委员会H20-A[6]的要求进行，并在低倍镜下观察全片。分析白细胞散点图、异常白细胞警示信息（包括原始细胞、幼粒细胞、异型淋巴细胞）、白细胞数、血涂片白细胞分类与白血病及其亚型的关系。

    2  结果

    119例白血病中，32例慢性白血病的白细胞数均升高，87急性白血病中白细胞数升高50例、正常20例、下降17例，详见表1。119例中除1例ALL患者散点图正常外，其他118例均出现不同程度的散点图异常，其中CML、M3的散点图比较有特征性，CLL的散点图虽有特征性，但有时与ALL等难以区分（见图1），其他白血病的散点图各种各样。各亚型白血病的异常白细胞警示信息总的情况见表1，其中CML、CLL及M3这三种类型白血病的异常白细胞警示信息变化小。119例中，警示有原始细胞者80例，血涂片证实78例确实有，符合率为97.5%；警示有异型淋巴细胞者34例，血涂片证实只有5例有少许，而29例中存在数量不等原始及幼稚细胞，符合率为14.7%；警示有幼粒细胞者69例，血涂片证实67例确实有，符合率为97%。初诊白血病患者散点图的白血病细胞系列与白血病的实际细胞系列符合为50%；而CML、M3（M3V除外）及CLL符合率为100%。

 3  讨论

    BECKMAN-COULTER.GENS是临床上最常用的血细胞分析仪，该仪器主要通过VCS三维分析原理，根据细胞的胞体体积、核质比、细胞内容物等各项分析指标，通过综合计算分析后将血细胞分为五类：即中性粒细胞（N）、淋巴细胞（L）、单核细胞（M）、嗜酸性粒细胞（E）、嗜碱性粒细胞（B），正常血细胞散点图见图1（a）。根据仪器的检测原理：胞体小、颗粒少，一般归入淋系；胞体大、颗粒少，一般归入单核；胞体中等大小、颗粒多，一般归入粒系。如果细胞胞体增大、颗粒少或无、核质比高，主要归入相应的原始细胞，这类细胞常位于相应正常血细胞群散点图的上方；如果胞体大、颗粒多，主要归入幼粒细胞。白血病是由于骨髓中白血病细胞呈克隆性增生，失去进一步分化为成熟细胞的能力，并伴有凋亡减少的一种常见血液系统恶性疾病。绝大多数患者外周血涂片中也出现相应异常细胞，其形态与正常血细胞存在着明显差异，所以仪器一般会出现白细胞散点图的异常及警示异常白细胞信息，丁志祥报道异常白细胞信息对检出异常细胞具有良好的提示功能[7]。但是由于白血病细胞形态多态性和复杂性、仪器分类系统及标本本身存在问题等因素[8]，均可导致使仪器分析结果出现偏差，所以目前白细胞分类标准仍是血涂片显微镜检查。

    本组119例初诊白细胞患者中，除1例ALL患者散点图正常也无警示异常白细胞信息外（由于患者白细胞数偏低，整张血涂片中原始细胞极少见），其他118例均出现不同程度的散点图异常。虽然每个白血病患者的散点图各不相同，但是CML及M3（M3V除外）二种白血病的典型散点图各有一定特征性。CML典型散点图特征为：在正常粒细胞区域（玫瑰色）上方，出现较多散点，以正常粒细胞区域最为密集；而嗜酸性粒细胞（橘红色）和嗜碱性粒细胞（白色）的散点图一般不明显；典型M3散点图特点为：粒细胞散点图明显上移至中上部，以上部最为致密。仪器对于成熟及较成熟的血细胞分类较准确，所以CML、M3（M3V除外）及CLL符合率可达100%。因此，根据异常散点图的特征，可有助于判断某些类型白血病，如进一步结合血涂片白细胞形态特点，将更有意义。例如①散点图表现为单独淋巴细胞群异常：血涂片中成熟淋巴细胞大量增加，一般为CLL；血涂片中原始及幼稚细胞大量增加，ALL可能性较大，其次M1、M2、M4、M5等；②散点图表现为单独粒细胞群异常：血涂片中幼粒和成熟粒细胞大量增加，嗜酸性和或嗜碱性粒细胞也增加，一般为CML；血涂片中以异常早幼粒细胞增加为主，一般为M3；③散点图表现为单独单核细胞群或单独粒细胞群异常：血涂片中以原始细胞增加为主，那么M1、M2、M4、M5等均有可能，而ALL的可能性较小；④散点图表现为两群或三群细胞异常：血涂片中以原始细胞增加为主，M1、M2、M4、M5、ALL均可能。

    118例散点图异常的白血病初诊患者中有7例无警示异常白细胞的信息，其中1例为CLL且观察血涂片证实无异常细胞，其他6例中血涂片存在数量不等原始细胞（1%～52%）或同时有少许幼粒细胞。118例中的1例（M1患者）仅提示幼粒细胞而实际上血涂片中大量原始细胞、少量幼粒细胞；2例（M3患者）提示有原粒细胞但血涂片中未发现。所以，如果散点图异常而无警示异常细胞者，应进行血涂片分类；而且警示异常细胞的种类与实际血涂片中细胞成份有一定出入。由此可见，散点图异常是检出白血病初诊患者并辅助判断白血病类型的重要指标（尤其是对于白血病数正常和或无警示异常白血病者来说）；初诊白血病患者警示异常白细胞信息，对判断异常细胞和白血病类型也有具有重要意义。仅警示原粒细胞和幼粒细胞者，其结果往往可信度高(与姜波报道一致[9])，多见于CML和M3；无警示异常白细胞或仅警示异型淋巴细胞或同时伴警示异型淋巴细胞者，多见于淋巴细胞白血病；警示异型淋巴细胞者，其结果往往不可信，而实际上常存在原始细胞及幼稚细胞，这可能是仪器在异型淋巴细胞与大淋巴细胞、单核细胞等鉴别存在较大困难[9]；无警示而散点图异常者，血涂片中多数也可检出数量不等异常细胞。

因此，在血常规分析中，仪器提供的各种指标要有区别地对待。除血细胞数外，检验人员应重视散点图、警示异常白细胞信息等，为临床医生提供更多的信息，使自动化血细胞分析仪在临床上发挥更大的作用。

【参考文献】
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[3] 刘素舫,卢爱平,汪杰.利用白细胞直方图诊断白血病初探[J] .中国实验诊断学,1997,8(1):40.

[4] 董家书.血细胞分析仪"Flag"提示信息的可靠性[J] .实用医学杂志,2006,22(23):2795-2796.

[5] 孙晋星,晋臻,沈荣华,等.Coulter-750 全自动血细胞分析仪在 白血病诊断中的应用 [J].检验医学,2005,20(4):338-339.

[6] National Committee for Clinical Laborabry Standards,Refer- ence leukocyte differential count(proportional)and evalua- tion of instrument methods:approved standard.NCCLS Docu- ment H20-A.NCCLS,Wayne,PA 19087.USA,1992.

[7] 丁志祥,薛宏峰,金文涛,等.Coulter Gens血细胞分析仪对形态异常细胞提示功能的评价[J] .国际检验医学杂志,2006,27 (2):185.

[8] 李继红,杨敬芳.库尔特STKS血液分析仪白细胞分类异常的 原因分析[J].临床检验杂志,2005,23(1):62-63.

[9] 姜波,吴红,陈世锋,等.全自动血液分析仪异常报警信息的分 析及临床应用[J].中华检验医学杂志,2006,29(11) :1013-1016.