卵巢癌患者血浆TM及EPCR检测的临床意义

作者                 作者单位

胡　敏     海南医学院附属医院血液科 海南 海口　570102

荣　红     海南医学院附属医院口腔科 海南 海口　570102

[ABSTRACT] Objective： To determine the plasma of thrombomodulin (TM) and endothelial cell protein C receptor (EPCR) levels in patients with ovarian cancer in order to explore their clinical significance. Methods： The levels of TM and EPCR were detected in 35 ovarian cancer patients， 28 cases of benign ovarian tumor， as well as 70 healthy control volunteers by ELISA. Results： 91.4% patients with ovarian cancer showed significant higher TM levels comparing with patients with benign tumors (P<0.05) or healthy control group (P<0.01). 21.4% patients with benign tumors showed slightly increased TM with no significant difference comparing with the control group (P>0.05). 80.0% patients with ovarian cancer showed significantly increased EPCR levels compared with patients with benign tumors (P<0.05) or healthy control group (P<0.01)， EPCR level also slightly increased in patients with benign tumors but there was no significant difference was shown comparing with the control group(P>0.05). Conclusions： Detection of Tm and EPCR level is helpful for the early diagnosis and treatment of ovarian cancer.

[KEY WORDS] Ovarian cancer; Thrombomodulin; Endothelial cell protein C receptor

维也纳大学附属医院的科学家于2003年7月在一份有关癌症与血栓关系的研究报告中称，突然出现血栓很可能是癌症的前兆。该研究报告的起草者英格里德帕宾杰说，血栓会增加罹患癌症、特别是泌尿生殖系统癌症和妇科癌症的危险。例如，已发现患有血栓的妇女患卵巢癌的危险是正常妇女的11倍[1]。血栓调节蛋白(Thrombomodulin，TM)是血管内皮细胞上的凝血酶受体，其生物结构为一单链跨膜糖蛋白，相对分子量为75kD，又称调凝蛋白，广泛存在于血管淋巴管内皮细胞。近年研究发现，TM可表达于多种肿瘤组织[2]，其应用于肝癌、胃癌、胰腺癌、肺癌、子宫内膜癌的诊断、转移、预后判断的研究多有报道[3]。血管内皮细胞蛋白C受体(EPCR)是继TM之后在肿瘤细胞表面发现的又一种与抗凝相关的蛋白，可在多种肿瘤细胞表达，可能与肿瘤的转移有关。本文通过检测卵巢癌患者血浆TM及EPCR的水平，探讨其在肿瘤发生、发展中的作用。

1　材料与方法

1.1　病例选择

选择2008年9月～2010年9月海南医学院附属医院妇科确诊的晚期卵巢癌患者35例，平均年龄(56.6±4.5)岁，卵巢良性肿瘤患者28 例，同期海南医学院附属医院绿卡中心健康体检妇女70例为对照组，平均年龄(53.4±3.2)岁。用含0.109 mol/L的枸橼酸钠的负压管采集患者和对照组空腹血液各2 mL，立即颠倒混匀，-70 ℃保存备用。

1.2　仪器与试剂

超低温冰箱(日本三洋)，离心机(安徽科大创新有限公司中佳分公司KDC-1042)，全自动酶标仪(美国宝特Elx-800)，低温冰箱(青岛海尔)，自动洗板机(芬兰Multiskan MK3)，TM(上海太阳生物有限公司)。

1.3　方法

TM的检测应用酶联免疫吸附测定(ELISA)的方法，操作严格按照试剂说明进行，均在研究结束时一批检测。

1.4　统计学处理

所得数据用SPSS11.5软件分析，数据以(x-±s)表示，两样本均数的比较采用student t-test，以P<0.05为差异有统计学意义。

2　结果

2.1　TM检测结果

91.4%(32/35)卵巢癌患者血浆TM明显升高，与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01);与良性肿瘤患者相比差异有统计学意义(P<0.05)。21.4%(6/28)良性肿瘤患者轻度升高，与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。

2.2　EPCR检测结果

80.0%(28/35)卵巢癌患者血浆EPCR明显升高，与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01);与良性肿瘤患者相比差异有统计学意义(P<0.05)。17.6%(5/28)良性肿瘤患者轻度升高，与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。表1　3组TM和EPCR检测结果

3　讨论

卵巢癌是女性生殖器三大恶性肿瘤之一，病死率高居榜首。研究表明，高达50%的恶性肿瘤及约90%转移性肿瘤存在凝血及纤溶的异常[4]。凝血系统异常是肿瘤病人死亡的第二大原因，肿瘤细胞中TM和EPCR 的表达在肿瘤转移过程中发挥着重要作用。肿瘤转移是多步骤的复杂过程，其中两个过程至关重要：一是肿瘤细胞进入血液循环，二是瘤细胞黏附到血管内皮细胞，TM和EPCR在此两个过程中起重要作用。

TM是血管内皮细胞表面的跨膜糖蛋白，在机体抗凝血机制中发挥重要作用。同时TM 参与调节肿瘤细胞的发生、发展及转移。徐根波等[5]观察33 例肝癌患者， 发现术后好转患者血浆TM水平回落，而术后复发转移时回升，认为血浆TM水平还可作为癌症术后病情观察的一种敏感指标，有助于发现临床高危患者和复发转移患者。本组资料显示，91.4%卵巢癌患者血浆TM明显升高，明显高于良性肿瘤患者和健康人，可能与本研究的卵巢癌患者均为晚期有关。多数学者认为组织学中肿瘤细胞表达越高， 肿瘤转移、复发机会越少，低或不表达的肿瘤细胞则更易发生转移，而在血浆中则反之，血浆值升高，则往往提示预后不良。血浆TM 的升高除来自肿瘤细胞自身外，也可能是肿瘤患者体内大量的蛋白溶解酶裂解内皮细胞表面的TM，使之脱落释放入血所致。肿瘤患者血浆TM 升高可能为肿瘤发展的后发事件，检测其水平可判断肿瘤的预后[6,7]。

EPCR是继TM之后在肿瘤细胞表面发现的一种与抗凝相关的蛋白，肿瘤细胞EPCR的过度表达有利于促进其增殖，抑制其凋亡，从而促进肿瘤的进展和转移。本研究表明，80%卵巢癌患者血浆EPCR明显高于健康人，表明EPCR 是恶性肿瘤细胞的重要生物学特征之一，推测卵巢癌患者通过分泌EPCR为其自身提供了一个免于凝血的生长环境，从而为恶性肿瘤的侵袭转移创造条件。EPCR作为一种重要的多功能蛋白，处于多种信号通路的交汇处，作为潜在的调节分子将蛋白C与凝血酶-血栓调节蛋白复合物的细胞信号转导通路紧密联系在一起，通过多种途径调控肿瘤的发生、发展、侵袭和转移。因此，EPCR对于研究肿瘤有重要的意义，检测血浆EPCR的含量对早期诊断和治疗肿瘤有着重大的指导意义。

综上所述，TM、EPCR作为天然抗凝途径的重要成员， 与许多疾病或病理状态有着密切联系，早期检测血浆TM、EPCR含量，有利于为肿瘤的临床诊断和治疗提供新的思路和帮助。

【参考文献】

海南医学院学报 Vol.17 No.3 Mar.20111　Levine MN，Lee AY， Kakkar AK. Thrombosis and cancer[M]. Am Soc Clin Oncol Educational Book,2005：748.

2　杨中思，谭齐贤.血栓调节蛋白与肿瘤研究进展[J].青岛大学医学院学报，2003,39(1)： 106-108.

3　Chizuko M，Enjinc J，Mari K，et al.Angiogenic switching in the alveolar capillaries in Primary lung adenocarcinoma and squamous cell carcinoma[J]. J Nippon Med Sch,2007,74(5)：344-354.

4　Yousef GM，Polylneris ME，GrassL，et al.Humankallikreins：a Potentialnove serum biomarker for breast andovarianecancer[J].Cancer Res.2003,63：3958-3965.

5　徐根波，罗吕宏，卢兴国. 癌症患者血浆和组织浸液凝血酶调节蛋白的检测及临床意义[J]. 浙江大学学报(医学版) ， 2003， 32 (2) ： 141-144.

6　Xu Xiao-hua， Lu Xing-guo， Xu Gen-bo， et al. Detection and clinical significance of thrombomodulin in both plasma and tissue extracts of cancer patient[J]. Chin J Cancer Res， 2004,16(2)： 105-108.

7　Hanly A M，Redmond NI， Winter DC， et al. Thrombomodulin expression in colorectal carcinoma is protective and correlates with survival[J].Br J Cancer， 2006， 94(9)： 1320-1325.