血培养分离支气管炎博德特菌2例并文献复习

  由支气管炎博德特菌引起的感染常见于野生动物或家养动物，如猪、狗、兔等，在人群中的感染则少见。国外文献资料中的数例支气管炎博德特菌感染，发生于免疫功能低下或免疫功能缺陷的人群，并可由家畜等动物传染给人类，因而引起科学家的高度关注[1].由支气管炎博德特菌引起的人类感染在国内则鲜见报道。本文总结了近期在2例患者血液中分离出的支气管炎博德特菌并进行相关文献复习。
  1临床资料
  患者1,男性，51岁，于2013年7月3日因“右股骨颈内固定取出术后，反复发热5d”而入本院骨科治疗。查体：体温38.5℃，心率76次/分，呼吸20次/分，血压130/80mmHg.实验室检查血常规：白细胞8.45×109/L,中性粒细胞79.7%,C反应蛋白大于200mg/L.后因“持续性发热，无明显规律，胸部CT示左肺下叶、右肺中叶及两肺下叶炎症病变”而转入呼吸科治疗。重要体征：双肺呼吸音粗，未及明显干湿音。给予阿奇霉素抗感染治疗无效，于2013年7月9日血培养分离出支气管炎博德特菌后改用莫西沙星治疗有效。经抗感染对症支持治疗后病情好转，复查血培养未见细菌生长，血常规：白细胞4.83×109/L,中性粒细胞62.3%,C反应蛋白40.4mg/L.其他各项指标基本恢复正常，于2013年7月19日出院。
  患者2,男性，65岁，于2013年7月11日因“膀胱癌根治回肠代膀胱术后1个月，发热1d”而入院。术后病理：膀胱高级别尿路上皮癌，浸润至固有层。查体：体温39℃，心率80次/分，呼吸20次/分，血压140/90mmHg,腹部可见陈旧性手术瘢痕及输尿管造口。实验室检查血常规：白细胞11×109/L,血红蛋白（Hb）120g/L,中性粒细胞82.6%,C反应蛋白64.3mg/L.于2013年7月16日血培养分离出支气管炎博德特菌后，给予左氧氟沙星治疗有效。经抗感染对症支持治疗后病情好转，血常规：白细胞9.09×109/L,中性粒细胞71.7%,C反应蛋白3.6mg/L.其他各项指标基本恢复正常，于2013年7月23日出院。
  2细菌学检查及结果
  2.1细菌培养及鉴定上述患者的静脉血按标准操作要求无菌采集10mL分别接种美国BD公司的BACTECPlusAero-bic/F血培养瓶（简称BD-P瓶）和法国梅里埃公司BacT/AlertFA血培养瓶（简称BA-F瓶），放入相应的BACTEC9240和BacT/Alert3D血培养仪进行培养。48h后培养瓶阳性报警显示有细菌生长，立即取出转种血琼脂平板和巧克力平板置35℃恒温箱，同时涂片做革兰染色，发现革兰阴性菌，单独或成群排列。35℃培养24h后血平板上形成淡黄色、圆形、光滑、湿润、边缘整齐的小菌落，巧克力平板上则呈现灰白色、圆形凸起、光滑、湿润、边缘整齐的小菌落，再次涂片做革兰染色，形态与直接涂片一致，氧化酶和触酶试验阳性，吲哚试验阴性，制备悬液使用法国梅里埃公司的VITEK2COMPACT全自动细菌鉴定/药敏仪进行鉴定，结果为支气管炎博德特菌，生物编码4040001201500000,鉴定值为99%.主要生化反应L-吡咯烷酮芳胺酶、谷氨酰芳胺酶pNA、L-脯氨酸芳胺酶、尿素酶、柠檬酸盐、L-乳酸盐碱化、琥珀酸盐碱化均为阳性，不发酵糖类，硫化氢、酪氨酸芳胺酶、α-半乳糖苷酶、磷酸酶、甘氨酸芳胺酶、鸟氨酸脱羧酶均为阴性。
  2.2药敏结果菌株1对氨苄西林、氨曲南、环丙沙星、头孢替坦、头孢唑啉、呋喃妥因耐药，对头孢曲松中介，对头孢哌酮、头孢哌酮/舒巴坦、美罗培南、氨苄西林/舒巴坦、阿米卡星、头孢吡肟、庆大霉素、亚胺培南、左氧氟沙星、复方磺胺甲唑、头孢他啶、妥布霉素、哌拉西林/三唑巴坦、哌拉西林敏感。菌株2对复方磺胺甲唑、头孢唑啉、头孢呋辛、头孢噻肟、氨苄西林耐药，对氨苄西林/舒巴坦、呋喃妥因、庆大霉素中介，对阿米卡星、氨曲南、环丙沙星、头孢替坦、头孢曲松、头孢吡肟、亚胺培南、左氧氟沙星、头孢他啶、妥布霉素、哌拉西林/三唑巴坦、哌拉西林、头孢哌酮/舒巴坦、美罗培南敏感。
  3讨论
  本文中分离的2例支气管炎博德特菌具有较典型的特征，如显微镜下可见革兰阴性菌，单独或成群排列，初步生化反应氧化酶和触酶试验阳性，吲哚试验阴性以及系统生化鉴定反应包括尿素酶（+），柠檬酸盐利用（+）等，并且该菌在血平板和巧克力平板上均生长。本研究同时采用了BD-P瓶和BA-F瓶进行培养，但仅BD-P瓶发出阳性报警并进一步分离获得支气管炎博德特菌，而BA-F瓶则未发出阳性报警，这可能由于两种血培养瓶对含抗菌药物血样中细菌的检测性能不同所致[2].限于实验室条件，未对分离到的支气管炎博德特菌进行血清学鉴定，建议在有条件的情况下做血清学鉴定试验。支气管炎博德特菌是一种非发酵、严格需氧的革兰阴性杆菌。它在猪、狗、兔[1,3-4]等动物中是常见的病原体，引起动物的急性和慢性呼吸道感染，在人类中的感染则较为少见。由支气管炎博德特菌感染引起的人类疾病虽然早在1911年已有报道，但直到多年以后才为其建立严格的细菌分类标准[5],后继的文献资料证实了支气管炎博德特菌是人类的条件致病菌。该细菌主要侵袭免疫力低下的人群，如新生儿、长期嗜酒者、糖尿病患者、慢性淋巴瘤患者或免疫功能缺陷者，引起急性医源性上颌窦炎、气管支气管炎、急性肺炎、腹膜炎及败血症等临床表现[6].本文中的2例患者均于手术治疗后发生了由支气管炎博德特菌引起的菌血症，可能与机体的免疫状况较差有关。
  根据已有的研究报道，不恰当的动物性接触和陪护工作在支气管炎博德特菌感染中可能起着重要的作用。Register等[7]从一名囊肿性纤维化患者的痰液标本中分离出支气管炎博德特菌，该患者曾有宠物猫接触史，通过对分离菌株的基因型鉴定进一步证实了猫为感染源。Rath等[8]报道了1例6周龄健康婴儿因与接种活疫苗的狗接触后发生支气管炎博德特菌感染而致呼吸衰竭。Ting等[5]发现支气管炎博德特菌在早产患儿身上诱发肺炎，推测该细菌可能由接触过宠物的陪护人员传染至该患儿导致院内感染。类似地，Huebner等[9]描述了2例骨髓移植患者由支气管炎博德特菌引起的院内感染。本文中的2例患者痰液中均未检测到支气管炎博德特菌，但2例患者术后均有护工陪护史，因而不能排除陪护人员引起支气管炎博德特菌感染的可能性。支气管炎博德特菌诱发人类感染的致病机制目前仍在探讨中。Ahuja等[10]认为普通的支气管炎博德特菌株多以非人类哺乳动物为宿主，而新发现的支气管炎博德特菌株（复合体Ⅳ株）则多从人类宿主分离获得，并通过体内和体外试验证实了该新型菌株的毒力水平明显高于普通菌株。但由于两型菌株的毒性均依赖于Ⅲ型分泌系统（typeⅢsecretionsystem,T3SS）活性及其效应蛋白BteA（bordetellatypethreesecretionsystemeffectorA），导致二者毒力水平间差异的机理亟待解决。
  综上所述，本文总结了从血培养分离出的支气管炎博德特菌的微生物学特征及其可能的致病机制。由于该细菌具有从动物传染至人的潜在危险性并可能引发院内感染，社会应给予高度重视。
  参考文献
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  （收稿日期：2013-11-13）