普罗布考对脑梗死患者急性期血清oxLDLAb水平的影响

　　作者：刘启兵　　作者单位：咸宁学院医学院，湖北 咸宁 437100

　　【摘要】目的观察普罗布考对脑梗死患者急性期血清氧化型低密度脂蛋白自身抗体(oxLDLAb)水平的影响。方法 采用自身对照和组间对照，将62例急性期脑梗死患者分为两组，其中普罗布考组(32例)，常规组(30例)。用酶联免疫吸附法测定治疗前后血清oxLDLAb水平的变化。以神经功能评分为标准，分别观察治疗7d和14d后两组的疗效。结果 ①普罗布考组治疗2周后，血清oxLDLAb水平较治疗前明显降低(P<0.05) ，神经功能明显改善(P<0.05)。②治疗2周后，普罗布考组血清oxLDLAb水平均较常规组明显降低(P<0.05)，神经功能明显改善(P<0.05)。③两组治疗前，血清oxLDLAb与LDL水平均具有相关性(P<0.05)。结论 普罗布考能降低脑梗死患者急性期血清oxLDLAb水平，通过稳定动脉粥样硬化斑块，减轻缺血性脑损伤，提高患者的近期疗效。

　　【关键词】 普罗布考 脑梗死 氧化低密度脂蛋白自身抗体

　　Effect of Probucol on the Level of oxLDLAb in Acute Stage of Cerebral Infarction LIU Qibing,ZHANG Zhaohui (Xianning University Medical School ,Xianning Hubei 437100,China) ABSTRACT：Objective To observe the effect of probucol on the level of oxLDLAb in acute stage of cerebral infarction.Methods Using random and single blind contrast,62 patients with cerebral infarction in acute stage were devided into probucol group (n=32)and convention group (n=30).With the method of ELISA,the level of oxLDLAb in serum was measured before and after therapy. At 7 d and 14 d,to observe curative effect by standard scale of clinical neurological deficit.Results ①After 2 weeks of followup,the level of oxLDLAb in serum was obviously decreased(P<0.05) and the neurological function was improved(P<0.05) in the probucol group.②The level of oxLDLAb in serum was obviously decreased (P<0.05) and the neurological function was improved(P<0.05)in the probucol group compared with the convention group after twoweek therapy. ③The level of oxLDLAb was depended on the level of LDL before therapy in the two groups(P<0.05).Conclusion Probucol can reduce the level of oxLDLAb in acute stage of cerebral infarction,probably,stabilize atherosclerotic plaque and relieve the ischemic brain injury to improve curative effect.

　　KEY WORDS： Probucol;Cerebral infarction;oxLDLAb

　　脑卒中是神经系统常见病和多发病，脑梗死约占全部脑卒中的70%。动脉粥样硬化是脑梗死的主要病因，氧化修饰低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein，oxLDL)与动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)的发展密切相关。oxLDL具有细胞毒性、免疫原性及趋化作用等，通过促进平滑肌细胞增殖、引起血小板聚集、加速单核细胞粘附等促进AS发生，进而导致脑梗死的发生和发展。氧化型低密度脂蛋白自身抗体(antioxidized LDL Autoantibodies，oxLDLAb)是以氧化修饰的LDL(oxLDL)为抗原产生的自身抗体，它可以确切反映LDL在体内的氧化修饰情况[1]。本研究观察普罗布考对脑梗死患者急性期血清oxLDLAb水平的影响，探讨普罗布考在脑梗死治疗中的作用。

　　1 资料与方法

　　1.1 研究对象

　　收集2006年6月至2007年2月武汉大学人民医院及武汉市第六医院神经科发病72h内的急性脑梗死患者,脑梗死的诊断符合全国第四届脑血管病学术会议制定的诊断标准。共有62例脑梗死病例入选。排除标准：小于18或大于75岁，伴有严重的心肝肾功能异常、恶性肿瘤、消化道溃疡病史的患者、孕妇及正在服用延长心电图QT间期药物(如胺碘酮等)、对普罗布考不能耐受、不依从或可能退出的患者。将上述患者采用随机数字法进行分组(常规治疗组30例,普罗布考治疗组32例)。常规组男14例，女16例，年龄(63.5±7.2)岁，病程(26.2±5.3)h。普罗布考组男、女各16例，年龄(64.2±9.5)岁，病程(25.9±6.3)h。两组患者入院时各项临床指标差异均无显著性意义。

　　1.2 给药方法

　　常规组：包括溶栓治疗、抗血小板治疗、降颅压治疗、并发症处理及基础疾病治疗等;普罗布考组在以上治疗的同时加用普罗布考(商品名：之乐，山东济南齐鲁制药有限公司生产，批号0510057)0.25g，2次/d，早、晚餐时服用，连续服药2周。两组患者治疗期间的饮食习惯、生活方式及伴随疾病所用的药物与治疗前保持一致，不用任何其它降血脂药和影响脂代谢的药物。用药期间监测肝功能及肌酶变化。

　　1.3 观测指标

　　1.3.1 血脂水平测定

　　于服药前清晨空腹抽取肘静脉血4ml，测定血脂水平(TC、TG、LDLC、HDLC等)以及血、尿、大便及肝肾功能等。服药2周后再清晨空腹抽取肘静脉血4ml，再测定血脂水平。

　　1.3.2 血清oxLDLAb水平

　　服药前及服药后2周清晨空腹抽取肘静脉血2ml，3000r/min离心后取血清置于-40℃冰箱保存待测。采用酶联免疫吸附法(ELISA法)测定血清oxLDLAb水平，试剂盒购于深圳市炬英生物科技有限公司(批号:TC59500)，严格按照说明书操作。先吸取100μl的稀释好的血清、标准(不用稀释)和质控血清(不用稀释)放入各反应孔中，用稀释缓冲液代替血清做空白，并使用TSP板封口。在室温下孵育1h，标记TSP板上已经使用过的小钉位置，小心移出TSP板放置在原来的板框内，在室温下干燥1h,再将TSP板(不要接触)用原可封口加干燥袋包装密封后，2℃～8℃下储存。用洗液(每孔每次最少200μl)洗孔3次，每孔加入100μl的酶标，用粘性箔封口。在室温下孵育30min。用洗液(每孔每次最少200μl)洗孔3次。每孔加入100μlTMB底物。在室温下避光孵育10min。每孔加入100μl终止液。30min内在450nm下检测吸收值。使用标准得到的曲线做半对数的图，在此曲线上直接读出待测血清的结果。

　　1.3.3 两组疗效评定

　　按全国第四届脑血管病会议修定的“脑卒中患者神经功能缺损程度评分标准”[2],分别对两组治疗前、治疗后7d和14d进行神经功能评分,以比较两组的疗效。

　　1.4 统计学方法

　　数据用均数±标准差(±s)表示，组间比较采用两独立样本均数间比较的t检验，指标间相关性采用相关分析，自身治疗前后采用配对比较t检验，P<0.05为差异有统计学意义。采用SPSS11.0软件进行统计学分析。

　　2 结 果

　　2.1 治疗前后两组血脂水平及血清oxLDLAb水平变化

　　两组治疗前血清TC、TG、LDLC及HDLC水平差异无显著性;治疗2周后，普罗布考组oxLDLAb水平治疗前明显降低(P<0.05)，且与常规治疗组比较有显著性差异(P<0.05)。而常规组治疗前后oxLDLAb水平差异无显著性意义，见表1。

　　2.3 血清oxLDLAb与LDL水平相关性分析

　　常规组治疗前血清oxLDLAb与LDL水平具有相关性(r=0.305,P<0.05); 普罗布考组治疗前血清oxLDLAb与LDL水平具有相关性(r=0.342,P<0.05)。

　　2.4 两组治疗前后神经功能评分比较

　　治疗2周后，普罗布考组神经功能明显改善(P<0.05)，且与常规治疗组比较差异有显著性意义(P<0.05)，而常规组治疗前后神经功能差异无显著性。(见表2)表1 治疗前后两组血清血脂和oxLDLAb水平变化与常规组治疗后相比，*P<0.05;与同组治疗前相比，△P<0.05表2 治疗前后两组神经功能评分比较与常规组治疗后相比，*P<0.05;与同组治疗前相比，△P<0.05

　　3 讨 论

　　oxLDL是AS形成过程中早期关键的步骤之一。研究证实，正常的LDL不易导致AS，一旦LDL被氧化成oxLDL，则可以导致内皮细胞损伤、促进血管平滑肌细胞增殖、引起血小板聚集以及加速单核细胞对内皮细胞的粘附，而卒中的危险因素可加速oxLDL的形成，从而促进动脉粥样硬化的发生和发展，导致卒中的发生[3]。LDL氧化修饰后产生免疫表型，触发自身免疫反应[4]，这种修饰在动脉粥样硬化的形成与进展中起了重要作用。在兔及人血清中存在oxLDLAb，这种抗体绝大多数为IgG，且以IgG1和IgG3为主。oxLDLAb是以oxLDL为抗原产生的自身抗体，它可以确切反映LDL在体内的氧化修饰情况。本实验结果也表明两组治疗前血清oxLDLAb与LDLC均有相关性。

　　普罗布考分子内所含的酚羟基很容易被氧化而发生断链，捕捉氧离子并与之结合形成稳定的酚氧基，有效降低血浆氧自由基浓度，抑制oxLDL的形成，从而预防或延迟动脉粥样硬化的发生和发展。本实验结果表明普罗布考具有抗氧化功能，能够降低脑梗死患者急性期血清oxLDLAb水平，即减少LDL的氧化及oxLDL的形成，从而减轻脑梗死患者急性期的脑损伤。

　　普罗布考作为一种强烈的抗氧化剂[5]已于近年来使用于临床，它不仅具有抗氧化作用，而且具有调脂、改善内皮细胞功能、抑制内膜增生和血管重塑等多方面的作用;它的脂溶性使其易于穿过内皮细胞到达血管壁及脂质斑块之间发生抗氧化作用，从而抑制了斑块的形成，改变斑块的成份而发挥强大的抗AS作用。但本实验结果表明普罗布考组治疗前血清TC、TG、LDLC及HDLC水平差异无显著性，这可能是由于用药时间过短。

　　我们按全国第四届脑血管病会议修定的“脑卒中患者神经功能缺损程度评分标准”,分别对两组治疗前、治疗后7d和14d进行神经功能评分，结果表明普罗布考组神经功能明显改善。因此, 我们认为普罗布考在急性脑梗死治疗中能减轻神经损伤作用, 提高治愈率，促进神经功能早期恢复,降低致残率。早期应用可以获得良好的治疗效果。

　　【参考文献】

　　[1] 李晓春,陈鹏,朱永良.氧化型低密度脂蛋白自身抗体及其免疫复合物与冠心病的相关性[J].浙江大学学报,2002 ,31(3):321

　　[2] 中华神经科学会.脑血管疾病分类诊断要点.神经功能缺损程度评分标准[J].中华神经科杂志,1996, 29(6):376

　　[3] Aviram M. Modified form of lowdensity lipoprotein and atherosclerosis. Atherosclerosis[J], 1993, 98(1):1

　　[4] Doggrell SA.Immunomodulation with DiNACa new approach to the treatment of atherosclerosis[J].Expert Opin Investig Drugs,2002,l1:717

　　[5] Russell JC,Graham SE,Amy RM,et a1.Cardioprotective effect of probucol in the atherosclerosisprone JCR：LAcp rat[J].Eur J Pharmacol,1998，350:203