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紫穗槐果实提取物的保肝作用研究(Ⅱ)

发表时间:2009-05-25     浏览次数:475次

文章摘要:研究紫穗槐果实提取物的保肝作用。方法 将小鼠肝脏HE染色制成石蜡切片后,光镜观察。结果 正丁醇部位低、中剂量组肝脏结果正常,而高剂量组有一定的肝损伤。结论 紫穗槐果实提取物具有明显的保护肝脏作用。

作者:李坤    作者单位:辽宁师范大学化学化工学院,辽宁 大连 116029

【摘要】  研究紫穗槐果实提取物的保肝作用。方法 将小鼠肝脏HE染色制成石蜡切片后,光镜观察。结果 正丁醇部位低、中剂量组肝脏结果正常,而高剂量组有一定的肝损伤。结论 紫穗槐果实提取物具有明显的保护肝脏作用。

【关键词】  紫穗槐 果实提取物 保肝

    紫穗槐Amorpha fruticosa L.为豆科(Leguminosae)紫穗槐属多年生落叶灌木,原产美国,辽宁省已广泛栽培[1]。对果实药理作用的研究,国内外研究相对较少。国外资料曾报道紫穗槐果实具有保肝作用[2],我们通过不同溶媒提取物的药理活性比较,确定正丁醇提取物具有活性,证明其具有一定的保肝作用[3]。本研究对其保肝作用进行了进一步的研究。

    1  材料和方法

    1.1  药  品

    紫穗槐果实经大连医科大学药学院刁云鹏鉴定为Amorpha fruticosa L.的果实,其提取物系用正丁醇从紫穗槐果实中提取(出膏率28%),由大连医科大学药化教研室提供;肝素康胶囊(批准文号:国药准字z23020322)远达药业集团哈尔滨中药六厂有限公司生产,购于沈阳东北大药房。二者用0.5%羧甲基纤维素钠(CMC:中国医药集团上海化学试剂公司,批号: F20011128)配成所需浓度备用,空白对照组、模型组均用0.5%羧甲基纤维素钠混悬液。

    1.2  仪  器

    显微镜:日本产OLYMPUS BX50高级系统生物显微镜;

    应用软件:Digital Camera Software(C3.0W 95E);

    石蜡切片机:美国AO型(辽宁省中医研究院国家三级药理实验室提供)。

    1.3  动  物

    昆明种小白鼠,体重18~22 g,雌雄各半,由大连医科大学实验中心提供。

    1.4  实验方法

    实验动物分为6组,即正丁醇提取物低剂量组(0.1 g/kg)、中剂量组(0.2 g/kg)、高剂量组(0.4 g/kg)、阳性对照组(肝素康胶囊 0.26 g/ kg)、模型组及空白对照组,每组10只,雌雄各半。给药容积为50 ml /kg,口服给药,每天1次,连续3天,空白对照组及模型对照组灌服等容积羧甲基纤维素钠混悬液。除空白对照组外,末次给药后ip 0.1%CCl4花生油,剂量10 ml/kg。于急性肝损伤实验取小鼠血液之后,处死动物取肝脏,放入10%甲醛溶液中固定24 h后,将其切成0.3 cm×0.3 cm×0.3 cm的组织块,用乙醇多梯度脱水,二甲苯透明2次,石蜡包埋,切片,进行HE染色。

    2  结  果

    紫穗槐果实正丁醇提取物的保肝作用HE染色结果见图1。

    图1可见正丁醇提取物低剂量雌性及雄性小鼠肝脏结构基本正常,肝小叶可明显区分。中央静脉有完整内皮,肝细胞索排列整齐,其间肝血窦内可见有内皮细胞和星形细胞,肝细胞索由肝细胞组成,肝细胞大小、结构正常,细胞界限清楚。肝细胞质内呈密

    肝细胞核着色浅,核仁清楚,亦有双核细胞存在(类似空白组)。

    正丁醇提取物中剂量雌性及雄性小鼠肝脏结构基本正常,肝小叶可明显区分。中央静脉有完整内皮,肝细胞索排列整齐,其间肝血窦内可见有内皮细胞和星形细胞,肝细胞索由肝细胞组成,肝细胞大小、结构正常、细胞界限清楚。肝细胞质内呈密颗粒状。肝细胞核着色浅,核仁清楚,亦有双核细胞存在,但部分区域某些边缘部分仍有些异常(类似空白组)。

    正丁醇提取物高剂量雌性及雄性小鼠肝脏结构不正常,肝脏大部分结构变实;肝小叶不完整;肝细胞索和肝血窦均不完整;肝细胞结构不完整,着色浅;细胞核周围出现小的空泡;中央部、小叶间部、小叶下部有些扩张。

 阳性对照组雌性及雄性小鼠肝脏结构基本正常,肝小叶可明显区分。肝小叶结构完整;中央部,肝细胞索和肝血窦均可视为正常;门管区亦无明显变化,但部分区域某些边缘部分仍有些异常(类似空白组)。

    肝损伤模型组雌性及雄性小鼠肝脏结构不正常,多数区域肝小叶不明显;肝细胞索不易分清楚,肝血窦狭窄;细胞索内肝细胞界限不清,肝细胞质内颗粒稀疏,肝细胞着色变浅,较明显的是在肝细胞之间或肝细胞内出现许多大的空泡;有些部位双核细胞数量增多,在门管区仍可见到小叶间动脉、小叶间静脉及小叶间胆管。

    空白对照组雌性及雄性小鼠肝脏结构基本正常,肝小叶可明显区分。中央静脉有完整内皮,肝细胞索排列整齐,其间肝血窦内可见有内皮细胞和星形细胞,肝细胞索由肝细胞组成,肝细胞大小、结构正常、细胞界限清楚;肝细胞质内呈密颗粒状;肝细胞核着色浅,核仁清楚,亦有双核细胞存在。在门管区、小叶间动脉、小叶间静脉及小叶间胆管均正常(以前在对照组也见过此种现象)。

    3  讨  论

    由于紫穗槐资源丰富,近年来辽宁省开展综合利用,其栽植于堤岸和铁路两旁作护岸、护路、防风等用途[4]。据记载其根、茎、叶可做药用,叶微苦、凉,具有祛湿消肿功效,主治痈肿、湿疹、烧烫伤。临床上单方应用,“治烧烫伤,痈疮,湿疹,紫穗槐叶适量外用”;花清热、凉血、止血[5]。但关于果实药理方面的报道和研究相对较少,本研究通过对小鼠病理的光镜检查验证了其低中剂量对肝脏具有一定的保护作用。但其抗肝损伤的确切机制是否与其抗自由基作用有关,仍值得继续研究。

【参考文献】
[1] 侯宽昭.中国种子植物科属词典修订版[M].北京:科学出版社,1982.

[2] 吴征镒.新华本草纲要(第二册)[M].上海:科学技术出版社,1991:9192.

[3] 李坤,刁云鹏,姜泓,等.紫穗槐果实提取物的保肝作用研究[J] .中医药学刊,2006,24(2):272273.

[4] 中国药科大学.中药辞海[M].北京:中国医药科技出版社,1997.

[5] 中国药材公司.中国中药资源志要[M].北京:科学出版社,1994.