暴马子皮提取物对四氯化碳所致小鼠急性肝损伤的保护作用

　　作者：姚大雷,韩在刚,贲亮,周微　　作者单位：1.延边大学药学院，吉林 延吉 133000;2.北华大学附属医院，吉林 吉林

　　【摘要】 [目的]研究暴马子皮提取物对四氯化碳所致小鼠急性肝损伤的影响.[方法]灌胃给予实验动物暴马子皮提取物，用四氯化碳制作小鼠急性肝损伤模型，用比色分析法测定小鼠血清天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、肝组织超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量.[结果]暴马子皮提取物可显著抑制四氯化碳所致小鼠血清AST，ALT浓度的升高，同时可升高肝组织内SOD活性，降低肝组织内MDA含量.[结论]暴马子皮提取物对四氯化碳所致小鼠急性肝损伤具有保护作用.

　　【关键词】 暴马子皮;肝;创伤和损伤;小鼠

　　Protective effects of the Syringa reticulata var. mandshurica extract against acute liver injury in mice

　　YAO Dalei1, HAN Zaigang2, BEN Liang1, ZHOU Wei1, JU Guangmei1, LI Gao1*

　　(1.Yanbian University College of Pharmacy， Yanji 133000, Jilin， China;2.Beihua University Hospital, Jilin 132000, Jilin， China)

　　ABSTRACT:OBJECTIVETo investigate the protective effects of the Syringa reticulata var. mandshurica aqueous extract against carbon tetrachloride induced acute liver injury in mice.METHODSThe Syringa reticulata var. mandshurica aqueous extract was administrated by oral, and the acute hepatic injury models were made by carbon tetrachloride in mice. The activities of ALT and AST in the serum, the concent of MDA and the activity of SOD in liver tissue were investigated by colorimetric method.RESULTSThe aqueousextract of Syringa reticulata var. mandshurica significantly decreased the levels of ALT and AST in serum and the content of MDA, but improved the activity of SOD in liver.CONCLUSIONThe Syringa reticulata var. mandshurica aqueous extract has the protective effects for the acute liver injury induced by CCl4 in mice.

　　Key words:syringa reticulata var;liver;wounds and injuries;mice

　　暴马丁香Syringa reticulate (Bl.) Hara var. mandshurica (Maxim.) Hara为木犀科丁香属落叶灌木或小乔木，别名暴马子皮、白丁香，其树皮、树干及枝条被称为暴马子皮，具有清肺化痰、止咳平喘及利尿之功能，主要用于治疗慢性支气管炎、咳嗽、咯痰、支气管炎、支气管哮喘和心源性浮肿等症.暴马丁香分布于我国东北、内蒙古、华北和西北等地区[1].前期研究中发现，暴马子皮提取物具有清除二苯代苦味酞自由基(DPPH)的能力.本实验探讨了暴马子皮提取物对四氯化碳所致小鼠急性肝损伤的保护作用，为进一步开发应用暴马子皮提供实验依据.

　　1 材料与方法

　　1.1 材料 暴马子皮采集于吉林省长白山东北坡，经延边大学药学院吕惠子副教授鉴定为正品.取0.5kg暴马子皮切碎，加入8倍量蒸馏水，加热回流提取3次，每次1h，合并滤液，减压浓缩，得暴马子皮浸膏62g.水飞蓟宾购自西安华萃生物技术有限责任公司.丙氨酸氨基转移酶(alanine transaminase, ALT)、天冬氨酸转氨酶(aspartate transaminase，AST)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)和丙二醛(malondialdehyde, MDA)试剂盒均购自南京建成生物工程研究所，其他试剂均为国产分析纯.主要仪器有小型离心机(Sigma 113)、722型分光光度计(中国厦门分析仪器厂)及SP4430型生物化学分析仪(SPOTCHEME2)等.实验动物取雄性昆明种小鼠，体重为18～22g，由延边大学医学部实验动物科提供.

　　1.2 方法 取雄性昆明种小鼠60只，随机分为正常对照组、模型对照组、阳性对照组、暴马子皮提取物大﹑中﹑小剂量给药组.大、中、小剂量组小鼠分别灌胃给予2.0,1.0,0.5g/kg暴马子皮提取物，灌胃给予阳性对照组小鼠0.5g/kg水飞蓟宾，正常对照组和模型对照组灌胃给予等体积生理盐水，每日1次，连续5d，末次给药1h后，除正常对照组外，其余各组小鼠均腹腔注射给予1.5mL/L四氯化碳花生油溶液5mL/kg，禁食，不禁水.18h后摘眼球取血，分离血清，取血后脱颈处死小鼠，剖取肝脏，在肝右中叶相同部位取0.1g肝组织，放入置有生理盐水的匀浆器中，在冰浴中制备成100g/L肝匀浆[2].按试剂盒说明测定血清ALT,AST浓度及肝组织SOD活性和MDA含量.统计学处理：数据以均数±标准偏差(±SD)表示，各组样本均数间差别的假设检验采用方差分析(ANOVA)进行.

　　2 结果

　　2.1 暴马子皮提取物对小鼠血清ALT,AST浓度的影响 由Table 1可见，模型对照组小鼠血清ALT和AST浓度较正常组明显升高，相比较有显著性差异(P<0.01)，提示模型制作成功.暴马子皮提取物大﹑中﹑小剂量组小鼠血清ALT和AST浓度较模型对照组显著降低，相比较均有显著性差异(P<0.05)，提示暴马子皮提取物可显著抑制四氯化碳所致急性肝损伤小鼠血清ALT和AST浓度的升高.

　　2.2 暴马子皮提取物对小鼠肝组织SOD活性和MDA含量的影响 由Table 2可见，暴马子皮提取物大﹑中﹑小剂量组小鼠肝组织SOD活性较模型对照组明显升高,MDA含量较模型对照组明显降低，相比较均有显著性差异(P<0.05).

　　3 讨论

　　化学性肝损伤模型是目前国际上常用的肝损伤模型，具有操作简便、病理模拟性及重复性好等优点[3].四氯化碳是经典的化学性肝损伤的毒剂，被广泛应用于肝坏死及肝损伤的研究.目前，公认的四氯化碳引起肝损伤的机制是四氯化碳在肝微粒体细胞色素P450激活下生成自由基CCl3及Cl,这些自由基可与肝细胞内大分子发生共价结合,也可攻击膜下不饱和脂质,引起脂质过氧化,损伤肝细胞,细胞质内ALT,AST渗入血液，使血清ALT,AST浓度升高.本实验结果表明，暴马子皮提取物可抑制四氯化碳所致肝损伤小鼠血清ALT,AST浓度的升高.SOD是细胞内主要的防御性抗氧化酶，可清除自由基，并可阻止自由基启动的脂质过氧化反应，从而起到保护细胞膜结构与功能的作用.MDA是脂质过氧化的最终产物，可严重破坏细胞膜的结构，导致细胞肿胀、坏死，它的含量可反映组织过氧化的程度[45].本实验结果表明，暴马子皮提取物大、中、小剂量组小鼠肝组织中SOD活性较模型对照组显著升高，而MDA含量则明显降低，提示暴马子皮提取物可能通过保护细胞膜，清除氧自由基，抑制脂质过氧化，而对肝细胞起到保护作用.

　　【参考文献】

　　[1] 严仲铠，李万林.中国长白山药用植物彩色图志[M].北京：人民卫生出版社，1997.341.

　　[2] 徐淑云，卞如濂，陈修.药理实验方法学[M].北京：人民卫生出版社，2002.1346.

　　[3] 朴丽花，金政，尹哲洙.悦肝口服液对四氯化碳所致小鼠肝细胞损伤的保护作用[J].延边大学医学学报，2005，28(2)：89.

　　[4] 张学武，关丽萍，权迎春，等.珍珠梅提取物中活性成分的分离及自由基的清除作用[J].延边大学医学学报，2003，26(4)：258.

　　[5] 张学武,朴龙,姜逢春,等.珍珠梅水提物对大鼠肝损伤的保护作用[J].世界华人消化杂志,2003,11(10):1497.