蒲公英对大鼠急性颅脑损伤治疗作用的实验研究

　　作者：张喆,鄢文海,杨波,焦庆芳,吕海欣　　作者单位：郑州大学基础医学院 郑州 450052 2)郑州大学第一附属医院神经外科 郑州 450052 3)郑州人民医院神经外科 郑州 450003

　　【摘要】目的观察蒲公英对急性创伤性脑损伤的治疗作用，并探讨该药的作用机制与超氧化物歧化酶(SOD)以及谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPX)的关系。方法 雄性SD大鼠48只，随机分成以下6组：正常对照组、假手术组、脑创伤组、蒲公英低剂量治疗组(LDT组)、蒲公英中剂量治疗组(MDT组)、蒲公英高剂量治疗组(HDT组)，每组8只大鼠。采用Marmarou法制造大鼠重型弥漫性颅脑创伤模型，采用生物化学观察蒲公英对大鼠脑组织中的丙二醛含量(MDA)、SOD活性、和GSHPX活性的影响。结果 与创伤对照组比较，LDT、MDT组大鼠脑组织MDA含量减少，差异有统计学意义(P<0.05);与创伤对照组比较，HDT组大鼠脑组织MDA含量明显减少，差异有统计学意义(P<0.01)。与创伤对照组比较，LDT、MDT组大鼠脑组织SOD活性和GSHPX活性升高，差异有统计学意义(P<0.05);与创伤对照组比较，HDT组大鼠脑组织SOD活性和GSHPX活性明显升高，差异有统计学意义(P<0.01)。结论 蒲公英通过增强创伤性脑损伤后SOD和GSH的活性，降低脂质过氧化的水平，从而对创伤性脑损伤具有保护作用。

　　【关键词】 蒲公英;创伤性脑损伤;超氧化物歧化酶;谷胱甘肽过氧化物酶

　　Therapeutical effect of taraxacum mongo on rats after acute brain injury Zhang Zhe, Yan Wenhai，Yang Bo.The Basic Medical College of Zhengzhou University， Zhengzhou 450052，China

　　【Abstract】 Objective To observe the effect of TM on TBI, and to investigate the relation between the mechanisms of TM and the activities of SOD and GSHPX.Methods Fortyeight male healthy SpragueDawley rats were randomly divided into 6 groups as follow :normal control group(C group),sham surgery group (SS group), traumatic brain injury group (TBI group, PR group), low dose TM treated group (LDT group), medium dose TM treated group (MDT group), high dose TM treated group (HDT group)， each group had 8 rats. TBI model was established by using improved Marmarou’ method. Biochemical assay was used to observe the effects of TM on MDA contents, activities of SOD, and the activities of GSHPX.Results The MDA content in LDT and MDT were significantly lower than those in TBI group (P<0.05); The MDA content in HDT was significantly lower than that in TBI group(P<0.01); Compared with the TBI group, the activities of SOD and GSHPX in LDT and MDT group significantly increased (P<0.05); The activities of SOD and GSHPX in HDT were significantly higher than those in TBI group(P<0.01).Conclusion TM can increase the reduced level of SOD and GSHPX activity, and inhibit the level of lipid peroxidation after TBI, and therefore has neuroprotective actions after acute traumatic brain.

　　【Key words】 Taraxacum mongo;Traumatic brain injury; SOD; GSHPX

　　创伤性脑损伤(traumatic brain injury, TBI)在现代人活动中有较高的发生率，继发性脑损伤是指在原发性脑损伤的基础上发生的一系列病理生理改变、脑组织各种物质代谢紊乱及细胞凋亡等，包括凋亡、氧自由基的释放等，它们均可造成脑组织的继发性损害，进一步加重TBI病人的脑损伤程度[12]。

　　蒲公英(taraxacum mongo,TM)是菊科多年生草本植物，现代药理研究表明，蒲公英具有光谱抗菌、抗突变、抗肿瘤、抗氧化等多种药理学用。但蒲公英对细胞凋亡是否有影响以及其对颅脑损伤能否起到治疗作用，目前国内外文献尚未见报道。本文观察蒲公英对急性创伤性脑损伤的治疗作用，并探讨该药的作用机制与超氧化物歧化酶(SOD)、以及谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPX)的关系。

　　1 材料与方法

　　1.1 实验动物 健康雄性SD大鼠，体质量300～350g，适应性饲养1周后进行实验。

　　1.2 药物及试剂 蒲公英由郑州市药材公司提供并鉴定。

　　1.3 实验方法

　　1.3.1 实验动物分组及处理：SD大鼠随机分为6组，每组8只。即正常对照组(C组)，假手术组(SS组)，脑创伤组(TBI组)，蒲公英低剂量治疗组(LDT组)，蒲公英中剂量治疗组(MDT组)，蒲公英高剂量治疗组(HDT组)。TBI组、LDT组、MDT组和HDT组大鼠按照Marmarou[13]方法制备重型弥漫性颅脑创伤模型。模型复制成功后，LDT组、MDT组和HDT组大鼠每日分别灌胃4g(kg•d)、8g(kg•d)、12g(kg•d)，连续3d，与治疗组同体积的生理盐水，连续3d;蒲公英低剂量治疗组(LDT组)：C组、SS组和TBI组每日灌胃同体积的生理盐水，连续3d。

　　1.3.2 检测指标：①脑组织MDA含量的测定方法[4];②脑组织SOD活性的测定[4];③脑组织中谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPX)活性的测定[5]。

　　1.4 统计学处理 应用SPSS 11.0统计软件包，采用方差分析，对数据进行统计学分析，数据用(±s)表示，检验水准α=0.05。

　　2 结果

　　2.1 蒲公英对急性颅脑损伤大鼠脑组织MDA含量的影响 与正常对照组、假手术组比较，创伤组大鼠脑组织中MDA含量均明显升高，差异有统计学意义(P<0.01);与创伤对照组比较，LDT、MDT组大鼠在蒲公英治疗3d后，其脑组织MDA含量减少，差异有统计学意义(P<0.05);与创伤对照组比较，HDT组大鼠脑组织MDA含量明显减少，差异有统计学意义(P<0.01)。提示中、小剂量的蒲公英能够抑制创伤性大鼠脑组织MDA含量的升高，大剂量的蒲公英能够明显抑制创伤性大鼠脑组织MDA含量的升高;空白对照组与假手术组2组大鼠脑组织MDA含量之间差别无统计学意义。见表1。表1 蒲公英对大鼠急性颅脑损伤后脑组织中MDA含量的影响同C组，SS组相比较，*P<0.01;同TBI组相比较，#P<0.05;同TBI组相比较，△P<0.01

　　2.2 蒲公英对急性颅脑损伤大鼠脑组织SOD活性的影响 与正常对照组、假手术组比较，创伤组大鼠脑组织中SOD活性均明显下降，差异有统计学意义(P<0.01);与创伤对照组比较，LDT、MDT组大鼠在蒲公英治疗3d后，其脑组织SOD活性升高，差异有统计学意义(P<0.05);与创伤对照组比较，HDT组大鼠脑组织SOD活性明显升高，差异有统计学意义(P<0.01)。提示中、小剂量的蒲公英能够促进创伤性大鼠脑组织SOD活性的升高，大剂量的蒲公英能够明显促进创伤性大鼠脑组织SOD活性的升高;空白对照组与假手术组2组大鼠脑组织SOD活性之间差别无统计学意义。见表2。表2 蒲公英对大鼠急性颅脑损伤后脑组织中SOD活性的影响 同C组，SS组相比较，*P<0.01;同TBI组相比较，#P<0.05;同TBI组相比较，△P<0.01

　　2.3 蒲公英对急性颅脑损伤大鼠脑组织GSHPX活性的影响 与正常对照组、假手术组比较，创伤组大鼠脑组织中GSHPX活性均明显下降，差异有统计学意义(P<0.01);与创伤对照组比较，LDT、MDT组大鼠在蒲公英治疗3d后，其脑组织GSHPX活性升高，差异有统计学意义(P<0.05);与创伤对照组比较，HDT组大鼠脑组织GSHPX活性明显升高，差异有统计学意义(P<0.01)。提示中、小剂量的蒲公英能够促进创伤性大鼠脑组织GSHPX活性的升高，大剂量的蒲公英能够明显促进创伤性大鼠脑组织GSHPX活性的升高;空白对照组与假手术组2组大鼠脑组织GSHPX活性之间差别无统计学意义。见表3。表3 蒲公英对大鼠急性颅脑损伤后脑组织中GSHPX活性的影响

　　3 讨论

　　蒲公英具有十分有效的保健作用，其热水提取液有一定抗肿瘤作用[6]。蒲公英提取物总黄酮能有效清除超氧阴离子自由基、羟自由基，抑制不饱和脂肪酸的氧化[7]。

　　大量的实验证据表明，各种氧自由基能攻击生物膜中的多不饱和脂肪酸，引发脂质过氧化作用，造成多种类型的细胞损伤[8]。本研究结果表明蒲公英能够有效减少脂质过氧化反应，对颅脑损伤大鼠有一定的保护作用。SOD是一类清除自由基的主要的蛋白酶，对需氧生物的生存起着重要的作用，是生物体防御氧毒性的关键，是唯一能够特异性清除超氧阴离子自由基(O2)的抗氧化酶。超氧阴离子自由基是体内其他自由基的最初引发剂，可能引发“瀑布状”自由基链式反应[9]。本实验结果表明蒲公英能够提高创伤性大鼠脑组织SOD活性，能够有效减少自由基对脑组织的损伤，是一种较强的自由基清除剂。GSHPX是细胞内抗脂质过氧化作用的保护系统主要成分之一，与维生素E协同地保护细胞免受氧化损伤。GSHPX可通过还原性谷胱甘肽催化还原过氧化物和有机过氧化氢物，清除体内脂质过氧化物，抑制其有害反应的重要作用，从而保护细胞和其他如DNA、蛋白及脂质体等敏感生物分子免受氧自由基的损伤[10]。本实验结果表明蒲公英能够提高创伤性大鼠脑组织GSHPX活性，能够有效减少自由基对脑组织的损伤。以上结果提示蒲公英通过增强创伤性脑损伤后SOD和GSH的活性，降低脂质过氧化的水平，从而对创伤性脑损伤具有保护作用。

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