白癜风患者血清及皮肤组织液sICAM1和IL12的水平

　　作者：陈建华,曾静,钟文俊　　作者单位：郧阳医学院附属太和医院1体检中心;2皮肤科，湖北 十堰 442000

　　【摘要】目的：探讨可溶性细胞间黏附分子1(sICAM1)和白细胞介素12(IL12)在稳定期白癜风患者血清及皮肤组织液中的变化。方法：将32例稳定期白癜风患者根据皮损分布分为寻常型与节段型，分别进行负压吸疱移植治疗，收集白斑及正常皮肤的疱液，同时抽取外周血5 mL，用ELISA法检测皮肤组织液及血清中sICAM1及IL12的水平。结果：寻常型白癜风患者局部白斑处皮肤组织液sICAM1及IL12水平较非白斑处显著增高;而节段型白癜风白斑与非白斑处皮肤组织液sICAM1及IL12水平无显著性差异。稳定期白癜风患者血清sICAM1及IL12水平与对照组相比，均无显著性差异。结论：寻常型稳定期白癜风患者局部白斑皮肤微环境处于免疫异常状态，sICAM1及IL12可能参与了其发病的某一环节。

　　【关键词】 白癜风;细胞间黏附分子1;白细胞介素12

　　Levels of Intercellular Adhesion Molecule1and Interleukin12 in Serum and Skin Tissue Fluid of Vitiligo Patients in Stable Stage CHEN Jianhua1，ZENG Jing2*，ZHONG Wenjun2 (Department of Dermatology，Taihe Hospital，Yunyang Medical College，Shiyan，Hubei 442000,Chian)

　　Abstract:Objective To measure sICAM1 and IL12 between vitiliginous and nonvitiliginous patches in patients with stable vitiligo, and to compare them in serum with normal controls. Methods Thirtytwo vitiligo patients in stable stage were divided into common type vitiligo and segmental type vitiligo. Suction blister fluid and peripheral blood were drawn and collected, and the enzymelinked immunosorbent assay was used to determine the levels of sICAM1 and IL12 in serum and skin tissue fluid. Result The levels of sICAM1 and IL12 in skin tissue fluid were significantly higher in vitiliginous skin than that in nonvitiliginous patches in patients with common type vitiligo, whereas there was no significant difference between the two kinds of patches in patients with segmental type vitiligo. There were no significant difference in the serum levels of sICAM1 and IL12 between vitiligo patients in stable stage compared with those in normal controls. Conclusion The immune function is abnormal in vitiliginous skin of the common type vitiligo patients in stable stage. It is suggested that sICAM1 and IL12 be involved in the pathogenesis of vitiligo.

　　key words:Vitiligo;Intercellular adhesion molecule1;Interleukin12

　　白癜风的病因及发病机制迄今尚未明确，但大量的研究提示本病的发生与自身免疫有关。白癜风的治疗相对困难，部分患者经药物及手术治疗后仍不能取得满意疗效，推测其全身及皮损局部可能处于免疫异常状态。细胞间黏附分子1(Intercellular adhesion molecule1,ICAM1)及白细胞介素12(Interleukin12,IL12)在介导细胞免疫和靶细胞黏附、趋化中起重要作用。为探讨sICAM1和IL12与白癜风发病之间的关系，对32例稳定期白癜风患者进行负压吸疱移植治疗，同时检测其血清及皮肤组织液中sICAM1和IL12的水平，进一步探讨其免疫学发病机制。

　　1 资料与方法

　　1.1 临床资料

　　32例患者为我院2005年1月-2008年1月门诊就诊病人，其中男20例，女12例，年龄18～51岁，平均年龄30岁。病程5个月-20年，平均病程4年。临床分型参照文献[1]，32例均为稳定期患者，其中寻常型22 例，节段型10例，疾病的活动性以手术前3个月内是否有新皮损出现判定。所有患者2个月内均未经治疗，排除本病以外免疫性疾病及系统性疾病。正常对照组为16例同期健康体检者，其中男9例，女7例，年龄20～47岁，平均年龄28岁，均无免疫性疾病及系统性疾病，无白癜风家族史。两组在性别、年龄上无显著性差异。

　　1.2 试剂与仪器

　　人sICAM1和IL12 ELISA试剂盒均购自深圳晶美生物工程有限公司。酶标仪为国产DG3022A型。

　　1.3 方法

　　1.3.1 血清采集：患者及正常对照组于晨8时空腹采外周静脉血5 mL，4 ℃下静置2 h后分离血清，置-20 ℃冰箱保存待检。

　　1.3.2 皮肤组织液的采集：采用负压吸疱仪分别于白斑及非白斑(距白斑边缘大于10 cm)处负压(-30～-60 kPa)吸疱，1～2 h后产生水疱，然后用无菌注射器收集疱液，置-20 ℃冰箱保存待检。

　　1.3.3 ELISA法检测血清及皮肤组织液中sICAM1和IL12的水平：严格按照试剂盒说明操作，450 nm处测吸光度A值，按标准曲线计算浓度。

　　1.4 统计学处理

　　实验数据采用SPSS 12.0统计软件进行处理，组间比较用t检验，P﹤0.05有统计学意义。

　　2 结果

　　表1 白癜风患者血清中sICAM1及 IL12水平的测定 表2 白癜风患者皮肤组织液sICAM1及 IL12水平的测定 与白斑处相比，*P﹤0.01

　　2.1 血清中sICAM1和IL12的检测结果

　　32例稳定期白癜风患者血清sICAM1及IL12水平与正常对照组相比，均无显著性差异，见表1。

　　2.2 皮肤组织液中sICAM1和IL12的检测结果

　　22例寻常型白癜风患者白斑处皮肤组织液sICAM1及IL12的水平均较非白斑处显著增高(P<0.01)，而节段型白癜风患者白斑与非白斑处相比，sICAM1及IL12的水平差异无显著性(P<0.01)，见表2。

　　3 讨论

　　白癜风是一种获得性色素脱失性皮肤病，其特征为皮损处黑素细胞的缺失。目前，本病的发病机制存在多种学说，其中涉及较多的是自身免疫学说。稳定期白癜风患者临床上常采用负压吸疱移植治疗，复色效果较好[2]。但仍有部分患者经手术治疗后难以达到满意疗效，推测其可能存在全身或局部免疫异常，从而影响了移植皮片的存活和复色。

　　ICAM1是介导细胞间炎症反应的重要黏附分子，sICAM1是ICAM1的脱落循环形式，其含量与体内ICAM1含量呈正相关。有研究发现进展期白癜风患者血清中sICAM1水平明显高于正常人，由此提示sICAM1可以作为白癜风活动性的一个指标[3]。本研究结果表明：稳定期白癜风患者血清中sICAM1与正常对照组相比，无显著性差异，不同类型的白癜风患者均是如此，提示全身性的黏附机制异常可能不是稳定期白癜风发病的主要机制。IL12是介导细胞免疫中重要的细胞因子，能诱导早期辅助性T淋巴细胞分化为Th1细胞，并促进体内IFNγ与TNFα的合成[4-5]。有大量研究显示：IFNγ与TNFα在白癜风患者外周血水平显著升高，并可诱导黑素细胞表面ICAM1的表达，促进淋巴细胞在病变局部的聚集[6]。本研究发现：稳定期白癜风患者外周血IL12水平与正常对照组相比无显著性差异，不同类型的白癜风患者均是如此，提示IL12并不是诱导IFNγ与TNFα在外周血高水平表达的直接原因，可能存在其他免疫调节机制，尚需更深入的研究和探讨。

　　在白癜风患者的皮损中可以观察到淋巴细胞外移现象，即真皮中的淋巴细胞上移至表皮，且黑素细胞的破坏与淋巴细胞的浸润表现出同步性，提示两者之间可能存在必然的联系[7]。ICAM1可以促进淋巴细胞与黑素细胞的黏附，从而导致黑素细胞的破坏;而IL12可以促进IFNγ与TNFα的合成，进一步诱导黑素细胞表面ICAM1的表达，并启动淋巴细胞-黑素细胞连接，这种连接在白癜风的发病机制中可能具有重要作用。本研究进一步检测了稳定期白癜风患者皮损局部sICAM1及IL12的水平变化，结果表明，寻常型白癜风患者白斑局部sICAM1及IL12水平较非白斑处显著增加，在移植失败的4例患者中表达尤为增多。由此推测sICAM1及IL12在皮损处的高表达，可以诱导大量淋巴细胞在病变局部聚集，并形成淋巴细胞-黑素细胞连接，从而使黑素细胞破坏增加，进而产生白癜风特征性的临床表现。而这种局部微环境的免疫异常也可能是导致移植失败的重要原因。节段型白癜风患者白斑与非白斑处sICAM1及IL12水平无显著性差异，提示局部黏附机制与免疫紊乱不是其主要的发病机制。

　　【参考文献】

　　[1]中国中西医结合学会皮肤性病专业委员会色素病学组.白癜风临床分型及疗效标准(2003年修订稿)[J].中华皮肤科杂志,2004，37(7)：440.

　　[2] Falabella R.Surgical treatment of vitiligo:why,when and how[J].J Eur Acad Dermatol Venereol,2003，17(5):518-520.

　　[3]杨 静，盛晚香.细胞间黏附分子1和白介素8与白癜风的相关性研究[J].中华皮肤科杂志,2003，36(11)：661.

　　[4]吴 欣.IL12和IL18与I型辅助T细胞应答[J].国外医学：免疫学分册，2002，25(5)： 224-247.

　　[5]张昌军，王 华，周艳梅，等.白细胞介素6及肿瘤坏死因子α对体外受精胚胎移植结局的影响[J].郧阳医学院学报，2003，22(5)：257-261.

　　[6]Huang CL，Nordlund JJ，Boissy R.Vitiligo:a manifestation of apoptosis?[J].Am J Clin Dermatol，2002，3(5)：301-308.

　　[7]Van den Wijngaard R,WankowiczKalinska A,Le Poole C，et al.Local immune response in skin of generalized vitiligo patients.Destruction of melanocytes is associated with the prominent presence of CLA+ T cells at the perilesional site[J].Lab Invest，2000，80(8):1 299-1 309.