烫伤膜体外透皮吸收的实验研究

作者:徐康康,李嵘,陈刚

【关键词】  烫伤膜；烫伤油；透皮吸收
［摘要］ 目的：考察烫伤膜的体外透皮吸收效果。方法：采用半透膜作为渗透屏障，研究烫伤膜及烫伤油的皮肤渗透作用。结果：烫伤膜可透过半透膜，释药动力学方程：Q=-2.4895 t2 +89.372t，r=0.9108。烫伤油24 h未能测出大黄素含量。结论：烫伤膜中大黄素具有较好的透皮效果。
　　［关键词］ 烫伤膜；烫伤油；透皮吸收
　　烫伤油为我院自制制剂，临床用于儿科烧伤、烫伤治疗，效果良好。但油剂存在不能封闭创口、易污染、有效成分溶出不完全的缺点。涂膜剂作为一种新型外用制剂，涂展性、生物融合性好，还可形成药痂保护创面［1］。我们将烫伤油进行剂型改良，制成烫伤膜剂［2］。现对其体外渗透吸收进行实验研究。
　　1  材料与仪器
 　1.1  材料和试剂大黄素对照品（中国药品生物制品检定所，批号07569908）。样品：烫伤油（南京儿童医院制剂室，批号010710），烫伤膜（南京儿童医院制剂室，批号20010110）。人工皮肤（海威生物材料有限公司，批号000912）。甲醇为色谱纯，其余试剂均为分析纯。
   
　　1.2  仪器智能药物溶出仪，ZBS4型（天津大学无线电厂）；LC10AT高效液相色谱仪，SPD10AV紫外检测器，CR6A色谱数据处理器（以上仪器均为日本岛津）。
   
　　2  方法和结果
   
　　2.1  大黄素测定方法的建立
   
　　2.1.1  色谱条件  VPODS色谱柱（150 mm×4.6 mm）；流动相：甲醇1%磷酸水溶液（85∶15）；流速：1.0 mL/min；检测波长：254 nm；灵敏度：0.02 Aufs；柱温：25 ℃；进样量：10 μL。对照品及供试品均在保留时间（tR）7.20 min附近出现单一大黄素吸收峰，空白供试品提取液在7.20 min附近未出现任何吸收峰，见图1。
   
　　2.1.2  大黄素标准曲线  精密称取大黄素对照品1.5 mg，加超声脱气蒸馏水5 mL溶解配成300 μg/mL溶液，再分别配成浓度为1、3、6、9、12、18 μg/mL的系列对照品溶液。分别吸取上述溶液10 μL进样，以峰面积值为纵坐标（Y），对照品浓度（μg/mL）为横坐标（X），绘制标准曲线，得回归方程：Y=36582.34X-17698.33，r=0.9997。大黄素在1～18 μg/mL浓度范围线性关系良好。
   
　　2.1.3  精密度实验  精密吸取6 mg/L的对照品溶液10 μL，重复进样5次，计算峰面积平均值，结果RSD=1.54%。
   
　　2.1.4  回收率试验  按体外渗透试验项下操作，取0.5 h时释放液1 mL，旋转蒸发后以超声脱气蒸馏水定容至10 mL，过滤后得样品液，精密量取样品液10 μL，加入大黄素对照品（100 μg/mL）10 μL、5 μL、1 μL，分别制成高、中、低三种不同浓度的溶液，测定大黄素含量，计算得平均回收率为96.37%±0.64%。
   
　　2.1.5  稳定性试验  按体外渗透试验项下操作，精密吸取释放液10 μL，分别每隔2 h进样1次，连续6次，计算峰面积平均值，结果RSD分别为2.70%，表明样品在12 h内稳定。

　　图1  高效液相色谱图（略）
   
　　2.2  烫伤膜/油体外渗透实验
   
　　2.2.1  体外渗透试验  精密称取烫伤膜10 mL，置人工皮肤（每片6 cm×6 cm）扎成的袋中，用线扎紧，置于转篮，并放在杯中，释放介质为超声脱气蒸馏水150 mL。循环水温控制在（37±0.5）℃，转篮转速为75 r/min，分别于释放0.25、0.5、0.75、1、2、4、6、8、24 h，取释放液1 mL，及时补充等量新鲜的释放介质。样品按上述“测定方法”测定。精密称取烫伤油10 mL，置透析袋中，操作方法同上［3］。
   
　　2.2.2  样品的测定  取出释放液1 mL，旋转蒸发后以超声脱气蒸馏水定容至10 mL，过滤后得样品液，精密量取样品液10 μL，进样测定。

2.2.3  结果  不同时间烫伤膜中大黄素的的累积释放量见表1，释药曲线见图2。由表1可知，烫伤膜中大黄素具有较好的透皮效果，其释药动力学方程释为：Q=-2.4895 t2 +89.372t，r=0.9108。24 h时未能检测出烫伤油透皮释放液中的大黄素。
   
　　表1  不同时间烫伤膜中大黄素的累积释放量t（略）

　　图2  烫伤膜中大黄素的释药动力学曲线　略

　　3  讨论

　　烫伤膜处方为：虎杖94 g，地榆、黄柏、白芨、防己、苍术、元胡、木瓜各31 g，冰片3 g等。其中虎杖为君药，功能清热利湿，活血通络、去腐生肌、抗炎消肿。大黄素为虎杖主要活性成份，具有止血消炎、改善微循环的作用，可缓解烫伤后皮下组织液增生［4］。因此本试验以测定烫伤膜中大黄素的透皮吸收作为测定标准。我们采用智能药物溶出仪上蒙人工皮肤，进行体外透皮吸收试验。结果烫伤膜中大黄素可透过人工皮肤，释药良好。用烫伤油做同样实验，24 h时释放介质中未能测出大黄素，说明其有效成分不易释放，烫伤油中的大黄素对皮肤组织的穿透作用弱于烫伤膜。烫伤膜为油剂进行剂型改良后制成，可形成薄膜保护创面，同时逐渐释放所含药物起治疗作用，其制备工艺简单，不污染衣物。成膜材料甲壳素是一种生物高分子物质，当覆盖在创伤表面时，引起的生物组织反应小，且可被生物组织中的酶降解，将其作为烧（烫）伤的保护材料后，在镇痛、密着性、透气透水、干燥表皮形成等方面都有良好效果［5］。因此，作为一种儿科烧伤外用药，烫伤膜具有良好的开发和应用前景。

　　参考文献：
   
　　［1］ 张亚红, 朱卫丰, 刘红宁. 涂膜剂实验研究概况［J］. 中成药, 2003;, 25(8): 656658.
   
　　［2］ 李  嵘, 吴  建, 谭家风, 等. HPLC法测定烫伤油及烫伤膜中大黄素的含量［J］. 南京中医药大学学报, 2002, 18(5): 300301.
   
　　［3］ 赵维娟, 边佳明, 张  梅, 等. 加兰他敏乳膏体外透皮吸收实验研究［J］. 中国药房, 2005, 16(4): 265266.
   
　　［4］ 裴莲花, 吴  学, 金光珠. 虎杖化学成分及药理作用研究现状［J］. 延边大学医学学报, 2006, 29(2): 147149.
   
　　［5］ 廖  红, 董  志, 傅洁民. 甲壳素及其衍生物在烧伤、烫伤方面的药理作用及其应用［J］. 中国药房, 2004, 15(8): 507508.

　　南京医科大学附属南京儿童医院，江苏南京  210008

　　作者简介：徐康康（1965～），男，本科，副主任药师，电话：025833011386220，Email: lrlr0212@163.com。