125Ⅰ粒子诱导胃癌移植瘤B细胞淋巴瘤/白血病-2/腺病毒E1B19000相互作用蛋白3和Wnt9a基因表达和甲基化效应机制

本研究旨在探讨，勺粒子诱导胃癌移植瘤B细胞淋巴瘤/白血病一2/腺病毒E1B19000相互作用蛋白3(BNIP3)和Wnt9a基因表达和甲基化效应机制，现报道如下。
一、材料与方法
1.材料:’勺粒子为碘-125密封籽源，_L海欣科医药公司提供;BABL/c-uu/nu裸鼠数量48只，购于北京维通利华实验动物技术有限公司。G.将NCL-N87细胞复苏和传代制成6x1091L的细胞悬液，接种于裸小鼠皮下，1周后肿瘤生长到直径0.8一1.0cm时即制成裸鼠移植瘤模型。实验分组设计:随机分为实验组和对照组，对照组植人空白粒子(0mCi)，实验组植人，I粒子(0.9ruCi1。每4d用游标卡尺测量肿瘤的长、短径，28d处死两组荷瘤裸小鼠沮中瘤取出并保存肿瘤体二dxbz/2根据肿瘤体积绘制肿瘤生长曲线。肿瘤抑制率(%)(对照组瘤重-实验组瘤重)/对照组瘤重x100%.
3.通过Nimblegen人类基因表达该芯片检测两组间全基因组表达差异和甲基化DNA免疫共沉淀结合甲基化芯片技术(iIeDIP-Chip)检测BNIP3和Wnt9a基因的表达:MeDIP-PCR引物序列:B'VIP3(上游引物:5'-TGGCAAGAACAC-GGAAGA-3'，下游引物:5-TGGG'I0IT-GGGTTAGCAGT-3'};Wnt9a(_上几游引物:5’-CATCGGGAAGCGGGTAGAGC-3’，一游引物:5'-AAGAGGCGCAGGCATCACC-3)。
4.统计学方法:应用SPSS13.0统计软件分析;数据均以均数士标准差表示;采用t检验二、结果
zsI粒子照射抑制了裸鼠胃癌移植瘤的生长，肿瘤抑制率为54.$2%},`ZSI粒子治疗组与空白对照组比较BNIP3和}nt9a的表达水平上调了210%和164%，甲基化水平下调了50.9%和41.0%。
三、讨论
本实验结果显示，mI粒子植人肿瘤后1周内，对照组与治疗组小鼠肿瘤的平均体积变化不明显，第2周开始实验组肿瘤生长明显减慢，而对照组荷瘤裸小鼠肿瘤生长迅速。经过28d的近距离照射，治疗组的裸鼠肿瘤体积明显小于对照组。这说明’25I粒子抑制肿瘤生长效果明显而空白粒子对瘤体无抑制作用，zsI粒子低剂量率持续照射可有效杀灭肿瘤细胞。当来自基因表达芯片和MeDIP-ch币的数据配对以后我们发现表达的39个基因可能被’zsI粒子诱导的DNA甲基化激活，特征性地上调了‘zsI粒子实验组BNIP3和}nt9a的表达，而甲基化水平得到特征性的下降，提示BNIP3的静止可能是治疗的1个分子靶点,Wnt9。的过表达引起细胞周期抑制，使之停滞在GI间期[2J，这为’25I粒子照射治疗胃癌提供了实验依据。
参考文献
Murai M,Toyota M,Suzuki H. Aberrant methylation and silencing of the BNIP3 gene in colorectal and gastric cancer[J].Clinical Cancer Research,2005.1021-1027.
Xiang Y,Lin G,Zhang Q. Knocking down Wnt9a mRNA levels increases cellular proliferation[J].Molecular Biology Reports,2008.73-79.