T淋巴瘤侵袭转移诱导因子在中晚期结直肠癌中的表达及其与临床病理特征的关系

既往研究表明:肿瘤的侵袭及转移是导致患者复发和死亡的主要原因，探讨与结直肠癌侵袭及转移相关的因素有重要意义。近年来有研究表明T淋巴瘤侵袭转移诱导因子(Tiaml)在多种恶性肿瘤组织中呈阳性表达并与肿瘤侵袭转移密切相关。本研究旨在检测Tiaml在中晚期结直肠癌组织及正常结直肠组织中的表达，探讨其表达与临床病理特征的关系。
　　材料和方法
　　一般资料:标本源自于浙江绍兴县中心医院病理科。所选标木的患者术前均未接受放化疗，其中，正常结直肠组织30例、结直肠癌组织126例(高分化腺癌58例、中低分化腺癌68例)和淋巴结转移癌组织90例，术后发生远处转移组织28例。患者年龄36一71岁(平均58.3岁)。Tiaml兔抗人多克隆抗体、链霉菌抗生物素蛋白一过氧化物酶(SP)法检测试剂盒和二氨基联苯胺(DAB)显色试剂盒均购自北京中杉公司。
　　2.实验方法:收集2007年至2011年浙江绍兴县中心医院结直肠癌中晚期标本126例，常规石蜡包埋，厚2N,m切片，检测Tiaml表达免疫组织化学方法按试剂盒说明书操作，Tiaml抗体的工作浓度分别为1:5050.O1mol/L柠檬酸盐缓冲液抗原修复，DAB显色，苏木素对比染色，中性树胶封固。磷酸盐缓冲液(PBS)取代一抗作阴性对照，已知阳性标本作为阳性对照。
　　3.结果判断方法:Tiaml阳性表达于细胞质中，呈棕黄色或棕褐色颗粒。评分标准:一:无色，计0分;+:淡黄色，计1分;一:棕黄色，计2分;升:棕褐色，计3分;同样物镜下计数阳性细胞数:<25%为1分，25%一50%为2分，51%一75%为3分，>75%为4分。两项得分相乘)4定义为阳性表达。
　　4.统计学方法:应用SPSS17.0统计软件分析，Tiaml在结直肠癌组织中的表达率的比较采用厂检验。
　　结果
　　Tiaml在正常结直肠组织胞质中无表达或较弱表达，而在结直肠癌组织胞质中强表达，阳性表达呈棕黄色或棕褐色，见图1Tiaml在结直肠癌组织中表达的阳性率明显高于正常结直肠组织(P<0.01，表1)。其中II,}I,1V期阳性表达率分别为42.4%,64.6%,82.1%，差异有统计学意义(P<0.0l)_iaml在结直肠癌组织中的表达与肿瘤的分化程度、TVIN分期、淋巴结转移以及远处转移密切相关(P<0.05)，与患者的年龄、性别、吸烟史、肿瘤家族史以及肿瘤的大小无明显相关(P>0.05，表2)。
　　讨论
　　Tiaml最初是由荷兰癌症研究所Habets等通过在成纤维细胞上插人前病毒导致突变的方法，由BW5147小鼠T淋巴瘤细胞高侵袭变异株中分离而来，故命名为T淋巴瘤侵袭及转移诱导因子。Tiaml基因是一种鸟普酸转换因子(GEF)，能够催化底物分子中鸟昔酸二磷酸(GDP)/鸟昔酸三磷酸(GTP)转换，促进GDP的释放以及与GTP的结合，进而激活RacGTP酶激活蛋白1(Racl)，调节细胞骨架结构重组，促进细胞运动和迁移，参与基因表达调控、细胞增殖与凋亡。同时，研究表明，Tiaml具有1591个氨基酸，具有PHn功能区，它介导蛋白复合物的形成以及Tiaml的膜定位，参与蛋白质间的相互作用，能够把蛋白质锚定在质膜上，当Tiaml蛋白N端被切除后，可激活其致瘤活性，因此确定Tiaml是一种原癌基因。
　　本研究结果显示，Tiaml在正常结直肠组织中有较低程度的表达，而在肿瘤组织中呈高表达，通过阳性表达率的比较显示，Tiaml在肿瘤组织中的表达率明显高于正常组织;将Tiaml在肿瘤组织中的表达与临床病理资料结合分析，可见Tiaml在分化程度较低，伴有淋巴结转移或术后发生远处转移的患者中表达的阳性表达率明显高于分化程度较高，不伴有淋巴结转移或未发生远处转移的患者，这也就表明Tiaml基因在结直肠癌的发生、发展中可能起着重要作用。
　　(本文图1见封三)
　　参考文献
　　Nakamura T,Mitomi H,Kanazawa H. Tumor budding as an index to identify high-risk patients with stage Ⅱ colon cancer[J].Diseases of the Colon & Rectum,2008.568-572.
　　鲍同柱,赵红卫,郑启新. 反义转化生长因子-β1基因对骨肉瘤细胞表达转移相关因子的影响[J].中华实验外科杂志,2005,(4):94-95.doi:10.3760/j.issn:1001-9030.2005.04.035.
　　朱金明,余佩武,赵永亮. T淋巴瘤侵袭转移诱导因子1反义核酸抑制胃癌细胞侵袭黏附的研究[J].中华实验外科杂志,2007,(10):323-326.doi:10.3760/j.issn:1001-9030.2007.10.044.
　　陈霞,张晓波,邢继强. Tiam1和MMP-10在结肠癌组织中的表达及其与结肠癌浸润转移的关系[J].黑龙江医药科学,2011,(2):58-59.doi:10.3969/j.issn.1008-0104.2011.02.037.
　　Michiels F,Habets GG,Stam JC. A role for Rac in Tiaml-induced membrane ruffling and invasion[J].Nature,1995.338-340.
　　Habets GG,vander Kammen RA,Stam JC. Sequence of the uman invasion 2inducing TIAM1 gene,its conservation inevolutionand its expression in tumor cell lines of different tissue origin[J].Oncogene,1995.1371-1376.