革兰阳性球菌的体外耐药监测分析

近20年来，由于第3代头泡菌素等广谱抗生素的广泛应用和侵袭性操作的普及，革兰阳性球菌及耐药菌的感染率逐年上升。为了解革兰阳性球菌耐药感染现状，对我院2009年1月至2011年12月收治感染患者的临床标本进行细菌学培养和分离，并对革兰阳性球菌进行了构成和耐药性分析，现报道如下。
材料与方法
1.菌株来源:2009年1月至2011年12月我院急诊科送检标本中分离出无重复的革兰阳性球菌125株，细菌鉴定严格按《全国临床检验操作规程》第3版的规定进行。质控菌株为金黄色葡萄球菌ATCC43300、粪肠球菌ATCC51299，均由上海市临床检验中心提供。2药敏试验:采用K-B法进行药敏试验，按CLSI2009年版标准判断结果。
3.仪器及试剂:采用法国生物梅里埃公司TAB微生物鉴定仪及其配套试剂鉴定菌株，所用M-H琼脂购自上海伊华医学科技有限公司。
4.抗菌纸片:抗菌纸片青霉素、苯a西林、红霉素、克林霉素、庆大霉素、环丙沙星、万古霉素、吠喃妥因、复方磺胺甲基异恶哩、替考拉宁和利奈A}}胺由英国Oxoid公司提供。平板培养基和显色平板购自法国科玛嘉微生物技术有限公司。
结果
1.细菌种类分布:革兰阳性球菌125株，其中金黄色葡萄球菌68株(占总阳性球菌的54.4%),耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)40株(占金黄色葡萄球菌的58.8%)，甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)28株(占金黄色葡萄球菌的41.1%.检出凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)、屎肠球菌、粪肠球菌和溶血葡萄球菌分别为20株(16.0%),22株(17.6%),6株(4.8%),7株(5.6%)，其他阳性球菌2株(1.6%)。
2.药敏试验结果:4种主要革兰阳性球菌对11种常用抗菌药物的耐药率见表1.
讨论
革兰阳性球菌是目前不可忽视的院内感染一大类病原体，国内阳性球菌中分离率居前的多为金黄色葡萄球菌、CNS和肠球菌，本次监测结果与其相似，上述3种菌的检出率分别为54.4%,16.0%和22.4%金黄色葡萄球菌是致病阳性球菌中最常见的菌群，也是引起化脓性感染的重要病原菌。1961年英国首次发现了多重耐药MRSA，之后它的院内感染率迅速上升，从20世纪80年代之前不到5%迅速升高至目前60%'-z。本研究中分离出MRSA和MSSA分别占58.8%和41.1%,MRSA的检出率高于文献报道的52.7%'和40.6%。大多数葡萄球菌能产生p一内酞胺酶，使p一内酞胺酶水解产生对青霉素类抗生素的耐药性，而MRSA对所有在临床上应用的卜内酞胺酶抗生素、红霉素和喳诺酮类药物耐药。我们的研究结果显示，MRSA对庆大霉素、克林霉素、红霉素和环丙沙星等抗菌药物的耐药率高达87.5%一95.0%，并且高于MSSA。万古霉素等糖肤类抗生素仍为可有效控制所有葡萄球菌感染的极少数抗生素之一，在世界范围内己经发现13株耐万古霉素金黄色葡萄球菌(VRSA)，国内亦有学者发现VRSA。本次监测虽未检测到对糖肤类万古霉素、替考拉宁和利奈哩胺的耐药菌，但亦需重视和跟踪此类耐药菌的产生。
CNS为人体正常菌群，近几十年来，由于静脉导管、人工关节等植人物的大量应用，器官移植后免疫抑制剂和肿瘤化疗等细胞毒药物的使用，患者机体免疫力下降以及糖尿病等基础疾病发病率的增多等因素，CNS成为院内感染的机会致病菌，并且对常用抗生素高度耐药。本研究亦发现其对青霉素、红霉素、克林霉素和庆大霉素等高度耐药现象，耐药率超过65%。未见糖肤类万古霉素、替考拉宁以及利奈哩胺的耐药菌株，因此，目前针对严重CNS感染此类药仍为首选。
肠球菌为院内感染的阳性致病菌之一，美国感染系统已将其列为医院感染的第二大病原菌。肠球菌属共有17种，人类感染的肠球菌中以粪肠球菌和屎肠球菌最为常见，它们的耐药性较为复杂，既有天然的，又有获得性的。文献报道，近年来屎肠球菌的检出率高于粪肠球菌且呈逐年上升趋势。本研究检出屎肠球菌和粪肠球菌对红霉素、高浓度庆大霉素和环丙沙星耐药率为86.4%-100%和50.0%-66.7%，耐药性与文献报道相近。万古霉素对治疗由革兰阳性球菌引起的感染有较好的效果，然而随着临床应用的增加，屎肠球菌对万古霉素的耐药率逐年上升。我们未检出对万古霉素、替考拉宁和利奈哇胺的耐药菌株，可能与肠球菌检出株数较少有关，需继续观察。细菌耐药性是个全球性问题，耐药菌株快速增长给临床抗感染治疗带来极大的困难。若能连续和系统地对本地区进行耐药性监测，可较为准确地了解细菌的耐药趋势，为临床医师进行早期经验治疗和合理使用抗生素提供依据。
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