CK19、TPO、Galectin-3在甲状腺乳头状癌中的表达及临床意义

甲状腺乳头状癌是甲状腺恶性肿瘤中的常见类型，统计表明，超过80%的甲状腺恶性肿瘤为乳头状癌。根据甲状腺乳头状癌在光镜下的生长方式与胞核特点，可对乳头状癌做出初步诊断，但有时却难以准确鉴别出甲状腺乳头增生与乳头状癌。CK19、TPO、Galectin-3是特异性肿瘤标志物，在良恶性甲状腺肿瘤鉴别中起重要作用。为此，笔者对甲状腺乳头状癌患者肿瘤组织中CK19、TPO及Galectin-3表达情况进行检测，并分析其临床意义。

1资料与方法

1.1一般资料：选择我院2011年1月~2012年12月接受手术治疗的甲状腺标本共240例，其中男28例，女212例，按照2004年WHO内分泌肿瘤分类标准诊断为甲状腺乳头状癌者122例，其中经典型77例，滤泡型11例，隐匿型34例;良性甲状腺肿瘤118例，其中结节性甲状腺肿57例，桥本氏甲状腺炎32例，甲状腺腺瘤29例。

1.2方法：选用免疫组化试剂包括：上海长岛生物技术公司生产的即用型CK19鼠抗人单克隆抗体与工作浓度为1∶50的C3鼠抗人单克隆抗体;福州迈新生物技术开发有限公司生产的工作浓度1∶50的TPO鼠抗人单克隆抗体。标本经10%中性福尔马林固定后常规处理，以石蜡包埋后连续切片，保证厚度为3 μm，行常规HE染色。免疫组化染色则采用EnVision二步法：DAB显色，以苏木精复染，乙醇脱水后一中性树胶封固，选择阳性切片作为对照，PBS替代一抗作为阴性对照。

1.3判断标准：HE诊断与免疫组化结果判断由2名工作5年以上病理科医生评定，阳性标准为胞质/胞膜上显示棕黄色颗粒分布。免疫组化结果采用半定量法判断：①CK19与Galectin-3，阴性(-)：即无阳性细胞;弱阳性(+)：即阳性细胞<30%;中等阳性(++)：即阳性细胞介于30%~60%;强阳性(+++)：即阳性细胞>60%;②TPO，阴性(-)：即阳性细胞<30%;弱阳性(+)：即阳性细胞介于30%~50%;中等阳性(++)：即阳性细胞介于51%~75%;强阳性(+ ++)：即阳性细胞>75%。

1.4统计学方法：采用SPSS13.0统计软件进行数据分析，计量资料采用均数±标准差(x〖TX-*3〗±s)表示，计数资料比较采用χ2检验。以P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1CK19的免疫组化表达：122例甲状腺乳头状癌切片中，CK19表达中等阳性及强阳性者105例，阳性率94.3%;118例良性甲状腺肿瘤切片中，CK19表达中等阳性者4例，弱阳性7例，阳性率9.3%，乳头状癌与良性甲状腺肿瘤之间CK19阳性率比较差异具有统计学意义(P<0.01)。

2.2TPO的免疫组化表达：122例甲状腺乳头状癌切片中，TPO表达中等阳性及强阳性者7例，阴性者109例，阳性率10.7%;118例良性甲状腺肿瘤切片中，TPO表达强阳性者53例，中等阳性者41例，弱阳性24例，阳性率100%，乳头状癌与良性甲状腺肿瘤之间TPO阳性率比较差异具有统计学意义(P<0.01)。

2.3 Galectin-3的免疫组化表达：122例甲状腺乳头状癌切片中，Galectin-3表达中等阳性及强阳性者95例，阳性率96.7%;118例良性甲状腺肿瘤切片中，Galectin-3表达强阳性者3例，中等阳性者4例，弱阳性7例，阳性率11.9%，乳头状癌与良性甲状腺肿瘤之间Galectin-3阳性率比较差异具有统计学意义(P<0.01)。对各类甲状腺肿瘤组织中CK19、TPO、Galectin-3的表达情况进行比较后发现，甲状腺乳头状癌与其他甲状腺良性病变间差异有统计学意义。

3讨论

甲状腺病变的临床病理诊断中，一些不典型的病变采用常规手段难以鉴别，如HE染色方法对甲状腺肿瘤进行临床病理诊断并不绝对可靠，存在灵敏度及特异性较低的缺陷，特别是对甲状腺乳头状癌与乳头状增生、腺瘤的鉴别上存在较大困难。存在于甲状腺肿瘤上的特异性分子标志物具有较高特异性，已经成为病理检验中关注的重点[1]。研究表明，CK19在甲状腺乳头状癌中有较高敏感度，但在甲状腺良性病变中亦可表达，故特异度较低[2]。与本实验结果一致，甲状腺乳头状癌中阳性率为94.3%，以中阳性和强阳性为主，而在良性甲状腺肿瘤中阳性率则为9.3%，且以弱阳性表达为主。有研究显示，CK19对乳头状癌的诊断敏感性为98.5%，准确度为87.2%[3]，故当CK19阴性时，可基本排除甲状腺乳头状癌的可能。TPO是甲状腺素合成过程的关键因子，在正常甲状腺组织及良性病变中其为高表达状态，在恶性肿瘤组织中则为低表达。有报道显示，TPO鉴别诊断甲状腺良恶性病变中的敏感性与特异性分别为64%和99%，更有学者指出，在甲状腺乳头状癌中TPO表达明显缺失，与本研究结果基本一致[4]。Galectin-3同样可在甲状腺乳头状癌中高表达[5]，本研究检测结果显示，其表达同CK19极为相似，有报道显示，其在甲状腺良恶性肿瘤鉴别中，敏感度、特异度与准确度分别为98.5%、78.5%及88.7%，而联合CK19、TPO及Galectin-3对甲状腺乳头状癌与腺瘤进行鉴别，敏感性及特异性分别为90.2%和100%[6]，故在病理诊断中，可将三者联合应用，以提高诊断准确率。总之，通过本研究笔者认为，采用CK19、TPO、Galectin-3对甲状腺良恶性肿瘤诊断有较大意义，若将联合应用后的诊断结果作为标准，可提高甲状腺乳头状癌的诊断准确度。

4参考文献

[1]李加美，王强修,张珂,等.甲状腺乳头状癌分子标记物研究进展[J].中华临床医师杂志 (电子版) ISTIC，2012，6(23):7698.

[2]宋清斌，张观宇，李建华.CK19与PTEN在甲状腺乳头状癌的表达及意义[J].中国误诊学杂志，2011，11(4)：795.

[3]邓敏，叶顾萍，马建中,等.甲状腺乳头状癌中 CK19，Galectin-3，HBME-1 和 TPO 的表达及意义[J].临床与实验病理学杂志，2011，27(8)：843.

[4]郑璐滢，朱建善，王家东,等.Galectin-3，CK19和TPO表达在甲状腺良恶性肿瘤病理诊断中的价值[J].临床与实验病理学杂志，2005，20(4)：449.

[5]王新华，崔力.良恶性甲状腺肿瘤鉴别相关因子的研究进展[J].吉林医学，2008，29( 20)：1822.

[6]应香岚，应亚君，干志华,等.甲状腺乳头状癌与结节性甲状腺肿伴良性乳头状增生中CK19，Galectin-3，HBME1，CyclinD1及TPO蛋白表达特点及诊断价值[J].浙江医学，2012,34(2 0)：1650.

[收稿日期：2013-09-08编校：陈伟/郑英善]