东风痤康凝胶剂中挥发油的β-环糊精包合工艺研究

东风痤康凝胶是一种纯中药外用制剂,为我院治疗痤疮的有效验方,具有十余年的临床经验,由夏枯草、羌活、白芷、海藻、僵蚕、黄连、黄芩组成,具清热凉血、消肿止痛,美白祛瘢之功效。处方中羌活、白芷药材所含挥发油为该方主要有效成分,为避免挥发油在制剂制各中损失,并增加其溶解度和溶出率,提高制剂稳定性[1],拟采用β-环糊精(β-CD)对挥发油成分进行包合,本研究对其包合工艺进行了优化,确定了最佳工艺,方法和结果如下。

仪器和材料

HJ-5数显多功能搅拌器(常州润华电器有限公司);HsCT-G超声波中药提取器(济宁恒硕超声机械有限公司);⒛2A型电热恒温干燥箱(上海合恒仪器设备有限公司);RE-52旋转蒸发器(上海荆和分析仪器有限公司);分析天平(北京赛多利斯天平有限公司);奥林巴斯BⅫ3-”PO2显微镜。β环糊精(郑州天顺食品添加剂有限公司,批号:20110812,纯度:99.2%),石油醚(分析纯,上海凌峰化学试剂有限公司,批号:110215),无水乙醇(分析纯,汕头市光华化学厂,批号:20100704),醋酸乙酯(分析纯,临安青山化工试剂厂,批号:20090409)、无水硫酸钠(分析纯,济南天宇化工有限公司,批号:20110710);羌活、白芷药材购于山西省药材公司,经山西中医学院中药鉴定教研室鉴定为正品。

方法与结果

1.挥发油提取:按处方比例称取羌活、白芷药材,药材粉碎度为10目,加8倍量水浸泡1h,40℃超声提取60min.粗品加石油醚分5次逐步萃取,再加入无水硫酸钠,静置一夜,干燥脱水,以旋转蒸发仪使石油醚溶剂蒸发,得到橙黄色挥发油。收油率为67.5%,相对密度为0.8362g·mL-1。

2.正交试验设计及结果:本实验采用操作简便的饱和水溶液法对挥发油进行包合[2],以挥发油包合率、包合物收得率为考查指标,以挥发油与β-环糊精的比例(A)、包合温度(B)和包合时间(C)为考察因素,各因素水平见表1。通过L9(34)正交试验对包合条件进行优选,确定最佳包合工艺。正交试验结果见表2,方差分析结果见表3。

由表2极差分析值可看出,影响挥发油包合率和收得率的主次要因素依次为A)B)C,即挥发油与β-CD配比比例影响最大,其次为包合温度。由表3方差分析结果可看出,因素A有显著影响(P(0.05),因素B、因素C影响不明显,无统计学意义(P>0.05)。通过以上正交试验结果确定最佳组合为A2B3C1,最佳工艺条件为挥发油与β-CD比例为⒈8,包合温度50℃,包合时间1h。

3.挥发油β-环糊精包合物的制各[3]:按正交试验设计方案,称取一定量的β-CD,加一定温度的适量的水,制成饱和水溶液,水与β-CD的比例大约为15△,恒温搅拌,在一定温度下挥发油用无水乙醇(1△)稀释后,用注射器缓慢滴加到β-CD溶液中,边加边搅拌,搅拌速度为800r.min-1,恒温搅拌包合至规定时间,在4℃冰箱中冷藏I2h,过滤,用少量蒸馏水洗涤,再用少量石油醚洗涤3次,洗去未包合的挥发油,们℃真空干燥至恒质量,得β-CD包合粉末。

4.挥发油空白回收率测定:取挥发油1mL,按挥发油提取方法提取挥发油,测定回收的挥发油量,计算挥发油提取器的回收率为93.6%。

5.包合物收得率和挥发油包合率的测定:包合率是衡量包合效果的重要指标,包合率越高,包合效果越好,收得率在生产中有一定的意义,投入量一定时,收得率越高,包合率越高,故以包合率和收得率可作为包合工艺筛选的主要指标[4∶。(1)包合物收得率的测定[4]:精密称定正交试验中所得干燥包合物,计算包合物收得率.

7.包合物质量考察:(1)显微镜成像法:由于显微镜观察含药的包合物与不含药的包合物形状不同,因此按上述方法将β-CD制成β-CD空白包合物,再与处方中药物制成的包合物分别置显微镜(10×I0倍)下观察其形态是否有所不同,结果发现前者为规则、透明、块状的结晶,后者为不规则粉末,证明挥发油与β-CD确已形成包合物。(2)薄层层析法[5]:取β—CD制成包合物水饱和溶液作为样品溶液A;取挥发油50%乙醇溶液,作为样品溶液B;取包合物按挥发油提取方法提取的挥发油50%乙醇溶液作为样品溶液C;取β-CD水饱和溶液作为样品D。吸取上述4种溶液各10uL,分别于同一硅胶G薄层板上`氪样,以石油醚-醋酸乙酯(9:1)为展开剂,饱和30min后展开,晾干,以10%硫酸乙醇溶液喷雾显色。挥发油(B)、从包合物回收的挥发油(C)在相同的位置显相同斑点,β-CD挥发油包合物(A)和β-CD(D)在原点未展开,表明挥发油包合后确已形成包合物。(3)包合物稳定性考察:为验证包合物的稳定性,采用留样法对其进行考查。将干燥的挥发油包合物样品分装,在室温下避光贮藏,分别于1个月、2个月、3个月及6个月底取其中3份样品测定包合物中挥发油含量,计算挥发油的平均损失率。结果表明室温下避光保存半年后挥发油含量基本不变,制成的挥发油β—CD包合物具有良好的稳定性。

讨论

近年来,将药物包藏于β-CD及其衍生物的管状空洞中制成包合物的技术得到广泛应用,尤其中药挥发性成分可用β-CD包合挥发油,使其粉末化,制成散剂、胶囊剂、凝胶剂等剂型,这样不仅便于生产,而且可以提升药物稳定性,增加难溶性药物溶解度和生物利用度,减少药物的副作用和刺激性,使液态药物粉末化,掩盖药物臭味,防止药物挥发,达到提高疗效等目的。东风痤康凝胶剂作为外用治疗痤疮的中药制剂,为达到清热凉血、消肿止痛、美白祛瘢的治疗效果,应当具备分散性好、渗透性强、稳定性好、刺激性小、药效持久、制备简单、使用方便等特点。由于其中重要有效成分挥发油易挥发、疏水性强,影响溶解度和溶出度,降低药物的释药性能,部分挥发油对皮肤组织具有一定的刺激性,故直接加人制各凝胶必然影响制剂的质量。本研究采用β-CD包合技术,选取饱和水溶液法,通过正交试验设计优选出东风痤康凝胶剂中挥发油的β-环糊精包合工艺,操作简单,有利于减少其挥发油成分的损失、降低药物的刺激性、减少药物不良反应、提高生物利用度,可用于东风痤康凝胶剂的进一步研制,便于临床应用和工业生产。

参考文献

[1]侯芳洁,宋军娜.环糊精包合技术及其在中药药剂中的应用[J].北方药学,2011,(02):47-48.

[2]罗德全.饱和水溶液法制备莪术油β-环糊精包合物[J].黑龙江科技信息,2008,(11):172.

[3]杨明霞,邢建国,毛新民.辛蒿凝胶剂挥发油β-环糊精包合物的实验研究[J].中成药,2004,(11):951-953.

[4]卓玉娟,刘新,马廉举.正交试验优选鼻炎凝胶剂中挥发油的包合工艺[J].重庆医科大学学报,2009,(12):1692-1695.

[5]陈赟,刘洪梅,江周虹.清眩片挥发油提取及β-环糊精包合的实验研究[J].中成药,2006,(11):1662-1663.