微波消解-ICP/MS法测定替曲朵辛中的13种微量金属元素

　　替曲朵辛(tetrodotoxin)主要存在于河豚鱼、纽虫、嵘螺、蓝斑章鱼等生物体内，为自然界中毒性非常强的非蛋白质神经毒素。替曲朵辛还是一种Na+通道抑制剂，对中枢神经具有较强的抑制作用，具有消炎镇痛、局部麻醉、戒毒等功效，对多种钝痛及锐痛均有缓解作用，且不产生依赖性，可减轻晚期癌症患者的疼痛，其药用价值越来越引起重视，国内正在开发替曲朵辛作为戒毒药物。替曲朵辛不易从海洋生物内脏中提取，因其非常稀缺、导致价格昂贵。常规的重金属检查方法需要消耗大量的样品，需要建立一种消耗样品少的方法来检测替曲朵辛的重金属。电感藕合等离子体质谱法(ICP/MS)是目前发展较快的一种新的痕量分析技术，具有灵敏度高、精密度好、谱线相对简单、动态线性范围宽、可同时进行多元素快速检测等特点，已用于药品中金属元素的测定。本文建立了微波消解一ICP/MS法同时测定替曲朵辛中多种金属元素的含量，该方法用量少、检出限低、分析速度快。
　　1试验材料与仪器
　　1.1试验材料替曲朵辛原料药(批号:070701,070702,070703)由深圳宏锦天生化药业有限公司提供;Fluka多元素混合标准溶液;In内标(GBW(E)080270);牛肝标准物质(国家标准物质研究中心GBW080193);硝酸和双氧水(北京试剂公司)均为BV一3级试剂。
　　1.2试验仪器MettlerToledoAX26分析天平;Milestone微波消解炉;聚四氟乙烯高压消解罐;Mil-lipore超纯水处理系统;美国热电X一7电感藕合等离子体质谱仪。
　　2方法与结果
　　2.1实验条件及仪器参数射频功率:1.2kW;采样深度:90step;载气流速:0.85L·min;等离子体流速:13.0L·min_imin;辅助气流速:0.7L·min;蠕动泵转速:30r·min;雾室(玻璃球锥形雾室)温度:3℃;每点停留时间:10ms;点数/质量:3;重复次数:3;测量时间/元素:30ms;测量时间/次:0.45s;区域扫描时间/次:0.88s.
　　2.2溶液的配制
　　空白试剂:取硝酸与过氧化氢各1mL，同置微波消解罐中，拧紧罐盖，放人微波消解炉中，开始微波消解，消解程序见表1。待控温程序结束后，取出消解罐，冷却。开罐将试液倒出，用超纯水反复洗涤，试液与洗涤液合并定容至10mL，作为随行空白。牛肝标准物质溶液:精密称取牛肝适量(约1g)，置微波消解罐中，加人硝酸与过氧化氢各3mL，拧紧罐盖，放人微波消解炉中，开始微波消解，消解程序见表1。待控温程序结束后，取出消解罐，冷却。开罐将试液倒出，用超纯水反复洗涤，试液与洗涤液合并定容至100mL.
　　内标溶液:2x10-9g·g的In溶液。标准溶液:精密量取Fluka多元素混合标准溶液5-10,25-50,100,分别置100mL量瓶中，加水稀释至刻度，即得。供试品溶液:精密称取替曲朵辛适量(约20mg)，置微波消解罐中加人硝酸1mL,lmL过氧化氢，拧紧罐盖，放人微波消解炉中，开始微波消解，消解程序见表1。待控温程序结束后，取出消解罐，冷却。开罐将试液倒出，用超纯水反复洗涤，试液与洗涤液合并定容至10mL}
　　2.3线性关系考察取系列标准溶液分别进样分
　　析，各元素的线性关系良好，相关系数均0.9980在0.9999之间。
　　2.4方法准确性试验取牛肝标准物质溶液进样
　　分析，结果各元素的测定值与参考数据基本相符，说明该方法准确可靠。
　　2.5回收率试验精密量取Fluka多元素混合标
　　准溶液100},L与精密称定的牛肝标准物质适量(约19)，一起置微波消解罐中加人硝酸及过氧化氢各3mL，拧紧罐盖，放人微波消解炉中，开始微波消解。待控温程序结束后，取出消解罐，冷却，开罐将试液倒出，用超纯水反复洗涤，试液与洗涤液合并定容至100mL，取该溶液进样分析。结果13种微量元素的回收率良好，均在85%一109%之间。
　　2.6检测限取空白溶液进行反复测定，连续进样10次，以空白溶液测定结果的3倍标准偏差所对应的浓度值，作为方法的检测限。
　　2.7供试品的测定结果取3批替曲朵辛原料药，每批各3份按照上述方法进行测定，计算各元素的含量。结果3批替曲朵辛原料药中13种元素的含量总和分别为7x10-6,8x10-6,8x10-6g·g。
　　3讨论
　　3.1使用微波消解处理样品，消解快速，污染和损失少，应尽量使用四氟乙烯材料，避免玻璃仪器对金属离子的吸附。
　　3.2ICP一MS法检出限低，可有效降低样品的用量，同时该方法准确、快速、简便，可同时测定多种微量金属元素。
　　3.3样品测定结果显示，3批原料药中13种金属元素的总量均小于百万分之十，说明该样品工艺中重金属残留量少，在允许范围内，可以将其质量标准中的限度制定为不得过15x10.
　　参考文献
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