丹参舒心胶囊中丹酚酸B的含量测定

丹参舒心胶囊是由丹参提取物精制而成的单方制剂[l],具有活血化淤、安神之功效。丹酚酸B在丹参药材中含量较高,具有较强的抗氧化作用,对心脑血管等各器官具有很好的保护作用[2-3],在丹参的功效中占有重要地位,⒛10年版《中华人民共和国药典》把它作为丹参药材质量评价的主要指标之一[4]。在现行标准中,没有丹参舒心胶囊水溶性成分的含量测定,为更好控制药品质量,笔者通过实验,建立了水溶性成分丹酚酸B的含量测定方法,为产品生产质量的控制提供了科学依据。

1仪器与试药

1.1仪器Agi1ent1100高效液相色谱仪、配置自动进样器、二级管阵列检测器、柱温箱。

1.2试药乙腈(色谱纯,天津四友生物医学技术有限公司)、磷酸(色谱纯,天津市科密欧化学试剂开发中心)、超纯水。甲醇(色谱纯,天津市科密欧化学试剂开发中心)。丹酚酸B对照品(批号:111562-200502)、丹参对照药材(批号:11071⒋200512)均购于中国食品药品检定研究院。丹参舒心胶囊。

2方法与结果

2.1色谱条件色谱柱为pllenomeneX C18(250mm×4.6mm,5um);流动相为[甲醇-乙腈(30∶10)]-0.笏%磷酸(45∶55);流速1.0mL·min1;检测波长286nm;柱温⒛℃;进样量10uL。理论板数按丹酚酸B峰计算,应不低于3000。

2.2溶液的制各

2.2.1对照品溶液的制各精密称取丹酚酸B对照品10.89mg,置25mL量瓶中,加75%甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,各用。精密吸取溶液10mL,置25mL量瓶中,加75%甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,制成0.17424mg·mL1溶液,作为对照品溶液。

2.2.2供试品溶液的制各取丹参舒心胶囊内容物(过孔径0.25mm筛)约0.2g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入75%甲醇溶液50mL,密塞,称定质量,加热回流1h,放冷,再称定质量,用75%甲醇溶液补充失重,摇匀,过孔径0.45um滤膜,即得。

2.2.3阴性对照溶液的制各按丹参舒心胶囊的制备工艺,去除丹参药材提取物(其余为淀粉、滑石粉、硬脂酸镁),制得阴性样品。取阴性样品约0.2g,按供试品溶液制备方法制各阴性样品溶液。

2.3阴性干扰实验分别吸取阴性样品溶液、对照品溶液、供试品溶液各10uL,进样,测定。结果表明阴性无干扰,见图1。

2.4线性关系考察取丹酚酸B对照品溶液,分别进样1,2,4,6,8,10,12,14uL,按实验色谱条件测定峰面积,以丹酚酸B的进样量(X,ug)为横坐标,峰面积(y)为纵坐标,进行回归分析,回归方程为:y=1276.204X-1.543,r=0.9999;表明丹酚酸B在0.1Z~2.439昭范围内线性关系良好。

2.5精密度实验精密量取同一对照品溶液,连续进样6次,进样10uL,平均峰面积为臼3.191,RSD为0.14%,表明仪器精密度良好。

2.6重复性实验取同批样品5份,每份约0.2g,按样品测定方法测定,结果样晶中丹酚酸B的平均含量为11,67mg·g1,RSD为0.540%。表明重复性好。

2.7稳定性实验精密吸取新制各的供试品溶液,按样品测定方法,每2h测定1次,共测定6次,丹酚酸B峰1面秃只分别为589.702,589.449,590.588,590.667,593.059,593.256,平均峰面积591.120,RSD为0.27%。表明样品在12h内稳定。

2.8加样回收实验取同一批已知含量的样品6份,每份约0.1g,精密称定,再按表1加入一定量对照品,进行含量测定,计算回收率。结果平均回收率为9T.15%,RSD为1.OT%。见表1。

2.9提取方法的考察分别以75%甲醇、水为溶剂,采用超声处理和加热回流提取方法制各供试品溶液。考察提取效果,结果以75%甲醇为溶剂的两种提取方法效果基本相同,以水为溶剂,测得结果较低。故采用75%甲醇回流提取1h较为适宜,见表2。

2.10样品测定按照上述实验条件、供试品溶液制各方法,测定丹参舒心胶囊中丹酚酸B的含量,用外标法计算。结果见表3。

3讨论

丹参舒心胶囊收载于《卫生部药品标准》中药成方制剂第7册(标准编号:WS33-B-⒓949),在标准中仅规定了以丹参酮ⅡA为指标的薄层鉴别方法,没有有效成分的含量测定,笔者以丹酚酸B的含量为指标,避免了单一成分为控制指标的不足。《中华人民共和国药典》⒛10年版一部收载的丹参中丹酚酸B的检测方法中,以甲醇-乙腈-甲酸-水(30:10:1∶59)为流动相,在检验过程中发现丹酚酸B不稳定,在未完成检测时出现分解现象,对照品峰面积不断降低,影响测定。笔者改用0.25%磷酸溶液,增强了丹酚酸B的稳定性。实验结果中丹酚酸B含量差别较大,一方面可能由于丹参原料产地不同或储存不当,另一方面可能由于生产工艺不稳定,在提取过程中水溶性成分丹酚酸B发生降解。因此需要保证原料和生产工艺的稳定,再制定出适宜的含量限度,确保产品质量。

参考文献：

[1]国家药典委员会.卫生部药品标准中药成方制剂[S].1993.27.

[2]常明泉,陈芳,黄良永.不同酒制工艺对丹参中丹酚酸B含量的影响[J].医药导报,2011,(09):1205-1207.

[3]王蓉,原永芳.丹酚酸B药理作用的研究概况[J].中医药导报,2011,(04):130-132.

[4]国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[S].北京:中国医药科技出版社,2010.70.