新生儿葡萄球菌败血症细菌学分类及耐药性分析

  新生儿血液感染是新生儿期常见的严重疾患，其发病率占活产新生儿的1‰~10‰，病死率为13%~50%[1],尤其在早产儿、低出生体质量儿中发病率更高[2].但临床上常缺乏特异性的症状，且症状不一定同时出现，所以血培养结果是诊断的重要依据。而临床经验性选择有效的抗菌药物必须了解本院抗菌药物的耐药情况，通过有效的对症治疗，达到良好的治疗效果。国内外文献报道，新生儿血液感染病原菌主要是革兰阳性菌，以葡萄球菌为主[3-4],所以作者对本院新生儿血培养中分离的葡萄球菌结果进行回顾性分析。
  1资料与方法
  1.1一般资料2012年7月至2013年7月从本院儿科新生儿室血液培养标本中分离102株葡萄球菌（排除同一患者重复分离菌株）。
  1.2检测方法无菌采集静脉血1~3mL注入美国BD公司儿童培养瓶，放入BACTE9120全自动血培养仪器中培养，仪器报阳转血平板置35℃培养箱培养分离出病原菌。菌株鉴定和药敏试验采用法国生物梅里埃公司ATBExpression微生物分析系统。
  1.3耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（MRCNS）检测采用最低抑菌浓度（MIC）法和纸片法检测。金黄色葡萄球菌对苯唑西林的MIC≥4μg/mL,凝固酶阴性非表皮葡萄球菌对头孢西丁纸片扩散法的抑菌环直径小于或等于24mm,表皮葡萄球菌对苯唑西林的MIC≥0.5μg/mL,即判为MRSA和MRCNS.
  1.4质控金黄色葡萄球菌标准菌株ATCC25923购于卫生部临床检验中心。
  1.5统计学处理使用WHONET5.5软件对数据进行分析。
  2结果
  2.1血培养葡萄球菌分布102株葡萄球菌，其中金黄色葡萄球菌33株（32.4%）；凝固酶阴性葡萄球菌69株（67.6%），包括溶血葡萄球菌31株（30.4%），表皮葡萄球菌25株（24.5%），其他葡萄球菌13株（12.7%）；耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）检出率30.3%,耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（MRCNS）检出率89.9%
  2.2主要葡萄球菌的耐药情况3种主要葡萄球菌对16种抗菌药物的耐药率见表1.
  3讨论
  新生儿尤其是早产儿和低体质量儿由于免疫器官尚未发育健全，所以对病原微生物的入侵极易发生感染而导致败血症，并且病情复杂多样，病死率高。因此，血培养检查是诊断血液感染的重要方法。但病原菌的检测和药敏试验又不能在短时间内获得结果，所以了解本院新生儿葡萄球菌败血症的细菌学分类和耐药情况对临床合理选用抗菌药物，及早控制病情，减少耐药菌的产生有重要意义。
  本次研究分离出的102株葡萄球菌中，金黄色葡萄球菌分离率最高，共33株，占32.4%,MRSA的检出率是30.3%.金黄色葡萄球菌在人体主要寄殖于鼻前庭黏膜、腹股沟、会阴部和新生儿脐带残端等部位，是医院感染常见的病原体之一。新生儿被感染和定植的金黄色葡萄球菌主要由于医护人员的触摸。医院内耐药性金黄色葡萄球菌的存在，常成为院内交叉感染和爆发流行的原因。
  随着抗菌药物的广泛应用，既往曾一直被认为是非致病菌的凝固酶阴性葡萄球菌感染日益增多。本研究显示凝固酶阴性葡萄球菌检出率（67.6%）已超过金黄色葡萄球菌（32.4%），凝固酶阴性葡萄球菌是一种常见的条件致病菌，可产生较强的致病性与耐药性，其含有的黏质等致病因子能产生黏附素使其易于滞留在物体表面，尤其对一次性注射器、输液器、输血袋这些光滑物体具有特殊的黏附作用，可在其表面形成厚实的生物膜，能使宿主体内局部的免疫反应呈抑制状态，有利于其增殖。
  由于新生儿免疫功能低下，对低水平毒力的条件致病菌易感染，早产或重症患儿在抢救中又接受静脉置管、机械通气等侵入性治疗措施，破坏了天然屏障，进一步损害了免疫功能，更易感染凝固酶阴性葡萄球菌[5-6].本研究分离出的8种凝固酶阴性葡萄球菌分布与国内报道有一定差异[7],考虑为不同医院和不同标本来源存在地域性差异，本院以溶血葡萄球菌和表皮葡萄球菌为主，应引起关注。MRCNS检出率达到89.9%,高于国内有关报道[8-9],反映出MRCNS在引起本院新生儿血液感1度重视。
  本组药敏结果显示，主要分离葡萄球菌对万古霉素、替考拉宁、米诺环素、奎奴普丁/达奴普丁呈高度敏感，对青霉素、复方磺胺甲唑、庆大霉素、红霉素、林可霉素、四环素、利福平、诺氟沙星、呋西地酸、呋喃妥因呈不同程度耐药。而MRS的高检出率导致对常用抗菌药物多重耐药，其耐药机制是细胞壁青霉素结合蛋白（PBP2）的变异，携带多种耐药基因，对氨基糖苷类抗菌药物产生钝化酶，对喹诺酮类抗菌药物的DNA旋转酶的基因变异等[10].本次研究未检出对糖肽类抗菌药物耐药的葡萄球菌，根据临床治疗革兰阳性菌常用药物选择，提示临床可把万古霉素作为MRS血液感染的经验首选药物。但随着万古霉素在临床应用范围的扩大和次数的增多，自然诱导产生耐万古霉素的MRS可能越来越大[11-12].所以应严格掌握其应用的适应证及疗程，对万古霉素进行保护性应用。
  细菌耐药性的传播主要取决于病原菌本身的适应性、抗菌药物选择压力和宿主免疫力等因素的相互作用[13].新生儿是个特殊的群体，临床处理要慎之又慎，盲目用药只会导致病情加重，不良反应增加。因此加强血培养病原菌分离及其耐药性监测对临床制定有效治疗方案有重要意义。
  参考文献
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  （收稿日期：2013-12-19）