唐山地区献血人群隐匿性乙型肝炎病毒感染分析

慢性乙型肝炎是我国常见的慢性传染病，严重危害人民健康。HBV的主要传播途径之一是通过输血或血制品引起，因此对于血液制品的检测，尤其是隐匿性HBV感染的检测，保证输血安全，提高血液质量非常重要。乙型肝炎隐匿性感染是指血清HBsAg阴性，但血清和（或）肝组织中HBV DNA阳性，患者可有血清抗一HBs ,抗一HBe和（或）抗一HBc阳性或血清学标志均为阴性，其血液仍具有传染性〔1。本中心于2010年12月至2012年8月在常规ELISA检测无偿献血者样本HBsAg，达到国家法定检验项目都合格样本116 741人份，同时应用核酸检测技术（nucleic acid testing, NAT）对HBV核酸进行检测，进一步用罗氏试剂检测HBV DNA滴度，发现部分隐匿性HBV感染血样。因此，单纯的ELISA法检测血清乙型肝炎标志物，可能会漏检隐匿性HBV感染，增加输血感染的风险。

1材料与方法

1.1样本来源2010年12月至2012年8月留取的本中心无偿献血者血样本，准备作ELISA和NAT检测，N AT样管采集12h内进行离心，置4℃保存，24 h内进行检测。

1.2主要仪器HAMILTON Sta:全自动加样仪；EZBead System一32核酸提取仪；全自动酶标仪、ABI7500实时荧光定量检测系统。

1.3主要试剂HBsAg ,抗一HBs , HBeAg、抗一HBe ,抗一HBc检测试剂盒（厦门英科新创和沈阳惠民），NAT检测试剂，初筛为HBV核酸检测试剂盒（上海浩源），HBV DNA确认试剂（Roche）。

1. 4  ELISA检测每个样本分别用两套ELIS-a试剂盒分别检测HBsAg ,抗一HBs } HBeAg、抗一HBe、抗-HBc，使用仪器配备的软件，根据各试剂说明书计算标准，进行结果判读。

1.5核酸检测
1.5.1核酸提取为全自动法（磁珠法）每批检测都设有阴性和阳性对照，每管都设有内对照，按试剂说明书上的判定规则进行结果判读。

1.5.2扩增检测实时定量PCR法检测HBV DN:4滴度。

1.6结果的确认ELIS;}1检测结果同时用两种试剂进行验证，均为阴性者判定为阴性，均为阳性者判定为阳性，一阴一阳者再重复一次实验。将NAT检测阳性的样本进一步用罗氏试剂检测HBV DNA滴度1.7统计学处理采用SPSS18. 0软件，率的比较用厂检验，P < 0. OS为差异有统计学意义二

2结果

2.1隐匿性HBV感染检出率共检测 HBsAg阴性116 741例献血者血液标本，N-}T检测阳性39例，占0. 33%},罗氏试剂检出HBV DNA阳性的隐匿性HBV感染35例，占0.29%0} OBI为HBV低水平携带，本研究检出的35例隐匿性HBV感染献血者HBV DNA载量除1例为2520 IU/ml外，其余97. 1%样本HBVDN A载量均小于10' IU/ml，最低载量<12 TU/ml

2.2隐匿性感染的HBV标志物模式35例隐匿性HBV感染者，HBV标志物抗一HBs ,HBeAg、抗一HBe、抗一HBe中一项或几项阳性27例，占77.1%;HBV血清标志物全阴性8例，占22.9% } HBV血清标志物阳性患者中，抗一HBc阳性与阴性分别为81.5%X22/27）及18. 5%（5/ 27），两者差异有统计学意义（丫二21.41, P< 0.01）。抗一HB*阳性与阴性率分别为55.6% （15/27及44. 4%（12/27），两者无统计学差异（丫= 0. 67，P > 0. 05。

3讨论

隐匿性乙型肝炎，因其感染的特殊性，自1999年以来越发受到人们的关注}z。有文献报道，在HBsAg阴性健康献血员中，有部分隐匿性HBV感染，仍可引起输血后乙型肝炎3-4]本研究中116 741人份HBsAg阴性无偿献血者样本中，35例HBV DIVA阳性，可确诊为隐匿性乙型肝炎，其感染率约为0. 29%c，与文献报道的江苏地区无偿献血者中隐匿性HBV 0. 80%。的感染率及深圳地区0. 49%‘的感染率研究结果接近5-61，而陈长荣等7报道南方某城市献血人群隐匿性肝炎的感染率为0. 19%，可能是各地区感染情况不一造成的。

隐匿性HBV感染已成为输血、血液透析以及脏器移植播散HBV的潜在危险；是隐源性肝病的致病因素，隐匿性HBV感染致病情恶化已有诸多报道，但发生机制尚不十分清楚是否与其病毒学特征有关，作者观察了病毒标志物模式。
隐匿性HBV%感染的病毒标志物模式存在多样形式，本文中抗一HBc血清标志物至少一项阳性有27例，占77.1，血清乙型肝炎标志物阳性的隐匿性肝炎患者中，抗一HBc阳性率比阻性率更高，两者差异有统计学意义，提示在隐匿性HBO'感染中，患者乙型肝炎标志物模式多表现为抗一HBc阳性。有研究显示抗一HBc与隐匿性HBV一感染有一定的相关性，可以作为既往HBV感染的标志，也可提示隐匿性HB}感染的可能〔9，因此刘一于抗一HB*阴性抗一HBc阳性献血员应详细检查NAT，以防漏检隐匿性HBV感染血源。既往认为抗一HBs为保护胜抗体，本研究中抗一HBs阳性占隐匿性乙型肝炎标志物阳性的55.6% （15/27，在抗一HB、阳性血样中也可检出HBV DNA，不能排除隐匿性感染，这在其他文献也有报道气本文隐匿性感染者血清乙型肝炎标志物五项均阴性有8例，占22.9% }  Torbenson等i1〕也报道超过20%的HBV隐匿性感染者血清乙型肝炎标志物是阴性。乙型肝炎标志物全阴性可能是HBV感染后逐渐丢失了血清标志物，或感染之初即丢失一了标志物，这一现象可在嗜肝病毒感染的土拨鼠模型上重现12.飞s说明隐匿性HBV感染存在着复杂的病毒学特征。上述数据表明血液检测中只进行HBsAg的免疫检测，可能漏检隐匿性HBV感染，对输血安全造成隐患，因此为了进一步提高血液的安全性，有必要在目前常规的ELISA法血液筛检体系中引进NAT检测来保障输血安全。

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