儿童手足口病免疫球蛋白与T淋巴细胞亚群的表达与价值

　　手足口病(handfootandmouthdisease，HFMD)是一种常见的儿童传染病，又名发疹性水疱性口腔炎，多发生于5岁以下儿童，尤其以3岁以下儿童发病率最高[1]。可引起手、足、口腔等多部位的疱疹，少数的患儿可引起肺水肿、心肌炎、无菌性脑膜脑炎等不同并发症，个别重症患儿如果病情发展快，可导致死亡[2]。该疾病以手、足和口腔黏膜疱疹或破溃后形成局部溃疡为主要的临床症状。导致手足口病的肠道病毒有20余种(型)，其中最常见的病毒为柯萨奇病毒A16型(CoxA16)和肠道病毒71型(EV71)[3]。

　　1　资料与方法

　　1.1　一般资料　50例患者均为本院2011年12月至2013年4月的住院患儿，年龄6个月至6岁，男性18例，女性32例，所有患者符合手足口病诊断标准。随机抽取同期在本院体检的30例健康儿童为对照组，男性12例，女性18例。两组对象年龄、性别、身高、体质量、营养状况等基本状况比较差异无统计学意义(p>0.05)，具有可比性。1.2　方法1.2.1　免疫球蛋白检测方法　在受试者住院或体检当日，空腹抽取静脉血3mL，并进行分离血清。采用比浊法对免疫球蛋白IgG、IgA、IgM测定分析，仪器为美国罗氏公式MODU-LARP800全自动生化分析仪，试剂由原装配套产品。

　　1.2.2　T淋巴细胞亚群检测方法　T淋巴细胞亚群检测采用美国BD公司的FACSCalibur流式细胞仪检测，并用Simulset软件自动分析得出结果，分别得出CD3+、CD4+、CD8+细胞的百分数，以及CD4+/CD8+细胞的比值。

　　1.3　统计学处理　采用SPSS13.0软件进行统计学分析。计量资料以x±s表示，多组样本均数比较采用单因素方差分析。以p<0.05差异有统计学意义。

　　2　结　　果

　　2.1　免疫球蛋白检测结果　手足口病组患儿与对照组IgG、IgA、IgM水平的比较，手足口病组IgG、IgA水平明显低于对照组，IgM水平明显高于对照组，差异均有统计学意义(p< 0.05)，见表1。

　　3　讨　　论手足口病肠道病毒感染机体后，可激活免疫系统中的体液免疫和细胞免疫，导致机体发生多种复杂的免疫功能变化，出现细胞免疫和体液免疫的功能紊乱[4]。当健康人肠道受到病毒感染，其体液免疫系统表现为免疫监视和防御病毒感染作用，人体内的免疫球蛋白在抗感染方面发挥重要的免疫调节作用[5]。其中，作为呼吸系统黏膜分泌型的重要抗体IgA，具重要预防局部感染作用;而由蛋白质多肽抗原产生免疫应答而产生的IgG抗体是病毒重要致敏原，作为人体重要保护性抗体，同时具有了中和游离外毒素、病毒、调理吞噬细胞的作用，对机体有重要的免疫作用及功能;IgM是在体液免疫反应早期阶段(一般为感染病毒的3～7d)产生的主要的免疫球蛋白，半衰期大约为5d。在血清的组成成分中，免疫抗体的浓度是稳定的，在某种疾病影响下才会有所变动，当幼儿感染手口足疾病尤其是EV71病毒时，患儿体内IgA的水平会出现明显下降，这表明患儿呼吸系统黏膜感染防御能力出现明显下降。同时IgM水平有很大提高，这是体内出现免疫应答反应所致。IgG免疫抗体来自母体胎盘免疫球蛋白，应在新生儿期代谢分解迅速下降，约6个月后全部消失，而到了儿童学龄期，IgG水平才达成人水平[6]。而在手足口疾病时，大量肠道病毒产生中和IgG抗体，导致机体IgG水平降低，进而降低呼吸道黏膜的防御能力[7]。近几年的研究结果显示，受到肠道病毒感染后T淋巴细胞是诱发免疫发病机制主要因素。T淋巴细胞对EV71特异性细胞免疫具有重要意义，病毒刺激机体引起的T淋巴细胞应答主要经两个途径发挥作用：(1)是组织相容性复合体Ⅱ (MHC-Ⅱ)限制性CD4+T细胞提供第二刺激信号辅助活化B细胞，诱导体液免疫反应、抑制病毒感染;(2)MHC-Ⅰ限制性CD8+T淋巴细胞通过释放细胞因子和直接接触杀伤病毒感染细胞、清除病毒[8]。T淋巴细胞亚群在人体免疫机制中不仅担当免疫反应细胞，还负责免疫调节功能和协调人体的免疫功能[9]。一般状况下T淋巴细胞亚群保持动态平衡，确保机体免疫功能的稳定状态，当病毒侵入机体后免疫功能不能正常进行，从而T淋巴细胞亚群数量与作用发生紊乱，整个机体免疫出现错乱，使对病毒的抵抗能力下降，进一步导致了疾病的产生与发展[10]。而儿童的免疫体系尚未发育完全，免疫功能未完全成熟，病毒容易侵入儿童体内，手足口病发生后，儿童机体免疫功能不能正常运转，引起体内T淋巴细胞亚群的数量和作用发生了改变。文献报告，CD3+、CD4+细胞数量减少，以及CD4+/CD8+比值的下降会导致B细胞分泌的加快，从而使体液免疫兴奋加大，使IgG形成免疫复合物，进一步去激活补体，进而导致免疫复合物黏附和沉积，导致幼儿的发病[11]。本文检验研究结果充分证明了这一点。在正常儿童机体内T淋巴细胞亚群互相的作用确保了机体的免疫功能正常，当其水平数量发生改变，机体免疫功能将不会正常运转，本研究显示，手足口病患儿确实存在细胞免疫功能调节障碍。本研究仅在临床领域对手足口病患儿的免疫球蛋白和T淋巴细胞亚群的水平变化进行了探讨，表明手足口病患儿存在着细胞免疫和体液免疫功能紊乱，提示肠道病毒感染可导致的机体免疫系统改变。

　　参考文献

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　　[2]李丽，庞保东，艾智慧，等.重症手足口病患儿心电图特征及实验室预警指标的研究[J].中国全科医学，2013，16(24)：2839-2841.

　　[3]VasiljcvicB，AntonovicO，Maglajlic-DjukicS，etal.TheserumlevelofC-rcactiveproteininneonatalsepsis[J].SrpArhCclokLck，2008，136(5/6)：253-257.

　　[4]王经伟，孙中运.手足口病患儿外周血淋巴细胞亚群及血清IL-6、IL-10变化的研究[J].天津医药，2012，40(9)：928-930.

　　[5]周涛，马力忠，付四毛，等.手足口病患者体液免疫与病情转归的相关性分析[J].广东医学，2010，31(18)：2434-2435.

　　[6]韦海春.手足口病患儿血清心肌酶与免疫球蛋白水平变化及结果分析[J].国医学创新，2008，5(35)：103-104.

　　[7]杜伯雨，白璐，沈岩，等.肠道病毒EV71感染对T细胞免疫功能影响的研究[J].医学研究杂志，2010，39(8)：50-53.

　　[8]赵明奇，连广琬，朱冰，等.手足口病患儿外周血淋巴细胞亚群的研究[J].中国实验诊断学，2010，14(5)：684-686.

　　[9]吕园园，徐家丽.手足口病引起免疫学变化及实验室诊断[J].细胞与分子免疫学杂志，2012，28(10)：1114-1116.

　　[10]莫扬，李智山.危重症手足口病患儿淋巴细胞亚群的检测[J].中国实验诊断学，2011，15(12)：2044-2045.

　　[11]刘虹，王春妍.手足口病患儿免疫功能临床分析[J].天津医科大学学报，2009，15(3)：503-504.

　　(收稿日期：2013-09-24)