RNA干扰沉默食管癌细胞株ECA109中人乳头瘤病毒18型E6、E7基因对人类白细胞抗原Ⅱ类分子表达的影响

冯彪,邓彦超,伊地力斯·阿吾提等.RNA干扰沉默食管癌细胞株ECA109中人乳头瘤病毒18型E6、E7基因对人类白细胞抗原Ⅱ类分子表达的影响[J].中华实验外科

RNA干扰 知识脉络 人类白细胞抗原Ⅱ类抗原 知识脉络 人乳头瘤病毒18型 知识脉络 食管癌 知识脉络

冯彪[1] 邓彦超[1] 伊地力斯·阿吾提[1] 买地尼也提·尼亚孜[2]

新疆医科大学第一附属医院胸外科,乌鲁木齐,830054 新疆维吾尔自治区食管癌研究所

2013年

545-548

知网,万方

目的 应用RNA干扰(RNAi)技术,使人乳头瘤病毒18型(HPV18) E6、E7基因表达下调或缺失,观察下调或缺失后的HPV18阳性食管癌细胞株ECA109细胞内的人类白细胞抗原(HLA)-Ⅱ类分子表达.方法 将合成并包装好的含有E6、E7基因片段的短发卡RNA (shRNA)腺病毒载体(shpAd-E6-eGFP、shpAd-E7-eGFP)感染食管癌细胞株,并用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)[E6 siRNA组HLA-ⅡmRNA表达量是空白组的1.27倍,E7 siRNA组HLA-ⅡmRNA表达量是空白组的1.66倍(P＞0.05]和Western blot技术[各组ACTIN蛋白条带灰度基本一致,shRNA-E6、shRNA-E7、无关序列和阴性对照组蛋白表达分别为0.5543、0.7246、0.4452、0.4365,siRNA E6、E7实验组灰度稍高于空白组(P＞0.05)及无关序列组]以β3-actin为内参照,在基因和蛋白水平上检测E6、E7和胞内HLA-Ⅱ类分子的表达。