去甲雄三烯醇酮的化学修饰及其免疫原性的构建

周成林,苏兆亮,朱卫华,王胜军,李平,许化溪.去甲雄三烯醇酮的化学修饰及其免疫原性的构建[J].江苏大学学报(医学版),2010,20(3):234-238.

去甲雄三烯醇酮,半抗原修饰,偶联,基质辅助激光解析电离飞行时间质谱

周成林,苏兆亮,朱卫华,王胜军,李平,许化溪

2010年

知网,万方

目的： 制备去甲雄三烯醇酮(又称群勃龙，trenbolone，TR)抗体以建立TR特异性检测方法。方法： TR与琥珀酸酐反应生成TR半琥珀酸酯(TRHS)，采用混合酸酐法和对乙基N，N二甲基丙基碳二亚胺(EDC)法将TRHS与牛血清蛋白(BSA)偶联制备其偶联物;质谱、核磁共振分析偶联结果;免疫家兔并用双向免疫扩散和ELISA检测抗血清效价，判断偶联物的免疫原性。结果： 经质谱鉴定显示，所获得的修饰物TRHS相对分子质量为370;核磁共振分析表明，各吸收峰与理论相符;基质辅助激光解析电离飞行时间质谱图谱分析表明，TRBSA相对分子质量明显增加、紫外最大吸收峰漂移;TR与BSA混合酸酐法和EDC法偶联比分别为1∶18和1∶12;混合酸酐法偶联物免疫家兔获得的抗血清效价ELISA测得TR特异性抗体效价为1∶320 000;双向免疫扩散测得的抗血清效价为1∶16。结论: 成功制备了具有明显免疫原性的TRBSA偶联物，为TR单克隆抗体的制备和建立TR残留量的快速检测方法奠定了基础。。