还原SDS-PAGE电泳不适于鉴定尿激酶原单链比例

杨波,李天德,王广义,陈练

知网,万方

目的：探讨还原SDS-PAGE电泳检测尿激酶原单链比例的价值。方法：用PCR扩增的方法构建抗凝血酶的尿激原突变体。Arg精氨酸156-Lys赖氨酸156点突变可删除凝血酶作用位点。将突变体基因转染入dhfr-CHO细胞（dihydrofolate reductase deficient -Chinese hamster ovary cells 二氢叶酸还原酶缺陷型—中国仓鼠卵巢细胞）。收取无血清培养上清液，用离子交换层析和凝胶过滤层析纯化抗凝血酶的尿激酶原（TRpro-UK)。结果：用还原SDS-PAGE。